《NKX2.1調控MKK4觸發EMT在結直腸癌侵襲轉移中的作用機制研究》是依託中山大學，由王磊擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：NKX2.1調控MKK4觸發EMT在結直腸癌侵襲轉移中的作用機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：王磊
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
MKK4基因參與腫瘤發生髮展，但其在腫瘤侵襲轉移中的作用機制仍不明確。我們前期發現MKK4-1304T＞G位點與腫瘤易感性相關，進而發現其與腸癌侵襲轉移相關，生物信息學分析及功能實驗揭示轉錄因子NKX2.1可能基於多態性位點調控MKK4，而MKK4表達改變影響上皮間質轉化（EMT）相關標誌物。因此，我們提出NKX2.1基於MKK4-1304T＞G位點多態性調控MKK4觸發EMT途徑促進或抑制腸癌的侵襲轉移的科學假設。並圍繞該假設開展以下研究：探究MKK4-1304T＞G位點多態性、MKK4、NKX2.1表達水平與腸癌侵襲轉移的相關性；闡明NKX2.1基於MKK4-1304T＞G位點多態性調控MKK4表達的分子機制；探討NKX2.1/MKK4通過EMT途徑促進或抑制腸癌侵襲轉移機制。本研究將有助於揭示 NKX2.1/MKK4通路在腸癌侵襲轉移中的分子機制，為指導腸癌靶向治療提供科學依據。
結題摘要
MKK4基因參與腫瘤發生髮展，但其在腫瘤侵襲轉移中的作用機制仍不明確，我們前期發現MKK4-1304T＞G位點與腫瘤易感性相關，並通過生物學分析手段推測NKX2.1可能基於多態性位點調控MKK4，而MKK4表達改變影響上皮間質轉化（EMT）相關標誌物的表達。本研究圍繞上述問題展開了相關研究，首先分析前期已建立的臨床病例佇列，結合病例資料和隨訪資料綜合評價MKK4-1304T＞G多態性位點與結直腸癌侵襲轉移之間的臨床相關性，發現MKK4 -1304T基因型與結直腸癌侵襲轉移相關，該基因型攜帶者總體生存時間明顯短於MKK4 -1304G基因型攜帶者。 前期研究發現MKK4-1304T＞G會影響MKK4的表達，然而MKK4基因在腫瘤發生髮展中以及腫瘤侵襲轉移中的作用機制不明確，我們首先通過TCGA、GEO等資料庫分析MKK4的表達譜與結直腸癌的發生髮展以及預後的關係，並在21對結直腸癌組織及癌旁組織qpcr、wb進行後續驗證，研究發現MKK4在腫瘤組織中表達低於癌旁組織（P＜0.05）,但在腺瘤組織與瘤旁組織表達並無明顯差異（P＞0.05）。生存分析發現MKK4高表達與患者預後良好相關，但並無統計學差異。我們繼而構建腸癌組織的試驗組和驗證組組織晶片，發現pMKK4表達與臨床病理因素及患者預後密切相關，研究成果已整理髮表在《Oncotarget》。據此，我們推測MKK4在結直腸癌中扮演著抑癌基因的角色。為了進一步證明MKK4的抑癌功能，我們構建了MKK4穩定表達的細胞株（DLD1、HCT8），並開展了一系列的細胞功能試驗，發現MKK4與腫瘤增殖、侵襲轉移以及5-FU耐藥密切相關。因此，我們推測MKK4在腫瘤的發生髮展過程中，受到了更為複雜的調控，有待更進一步的研究。
