《miR-338-3p在肝癌細胞上皮-間質轉化中的作用機制研究》是依託中山大學，由黃曉卉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：miR-338-3p在肝癌細胞上皮-間質轉化中的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：黃曉卉
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
上皮間質轉化（EMT）是腫瘤（包括肝癌）侵襲和轉移早期的重要過程，其主要特徵之一是上皮細胞極性喪失。研究顯示miR-338-3p是維持上皮細胞極性所必需的，但其對EMT 的作用及其機制尚不清楚。申請者發現：miR-338-3p是個新的抑癌miRNA，可顯著抑制肝癌細胞的遷徙，並證實SMO為其靶基因。研究已表明SMO依賴性的Hh信號通路是促進EMT的重要通路。在此基礎上，本課題提出：miR-338-3p能通過調控Hh信號通路抑制肝癌細胞EMT 的發生這一假說。本項目擬採用基因轉導、PCR、western blotting等方法，以獲得miR-338-3p通過調控Hh信號通路抑制肝癌細胞EMT的可靠證據；同時在臨床大量肝癌標本中分析miR-338-3p、Hh信號、EMT之間的相關性及對肝癌臨床病理、治療和預後的意義。該項目將為確立miR-338-3p作為抑制肝癌EMT的新靶點提供科學依據。
結題摘要
上皮間質轉化（epithelial-mesenchymaltransition，EMT）是腫瘤侵襲和轉移早期的重要過程。最近研究發現miRNA對EMT有很強的調節作用。本課題組前期工作首次發現：miR-338-3p是個新的抑癌miRNA，可顯著抑制肝癌細胞的遷徙，且證實SMO為其靶基因。但miR-338-3p是否能影響肝癌細胞EMT的發生及其機理尚不清楚。通過本項目的研究，我們發現通過miR-338-3p mimic恢復肝癌細胞中miR-338-3p的表達可逆轉肝癌細胞EMT及抑制肝癌細胞侵襲與轉移；反之，通過miR-338-3p inhibitor降低肝癌細胞中miR-338-3p的表達則可誘導肝癌細胞EMT促進肝癌細胞侵襲與轉移。此外，miR-338-3p mimic和miR-338-3p inhibitor可分別抑制和促進Snail1（EMT上游調控轉錄因子）和Gli1（sonic hedgehog (SHH)信號通路關鍵轉錄因子）的表達。Snail1 siRNA可逆轉miR-338-3p inhibitor對肝癌細胞EMT的誘導作用。進一步的研究還顯示SHH信號通路是miR-338-3p inhibitor誘導肝癌細胞EMT及促進Snail1表達所必需的。miR-338-3p在肝癌患者組織標本中表達下調且與病人的生存周期密切相關。通過臨床肝癌組織標本及動物原位肝移植模型組織標本證實miR-338-3p與E-cadherin表達成正相關，而與SMO, Gli1, Snail1, N-cadherin,及 vimentin表達呈負相關。本項目通過體內、外研究結果說明miR-338-3p通過SHH/Snail1信號通路抑制肝癌EMT。本項目結果不僅揭示miR-338-3p對肝癌細胞EMT的作用及其機制，而且將為確立miR-338-3p作為抗肝癌細胞EMT的治療新靶點提供科學依據和理論基礎。 本項目在完成原有計畫的基礎上還發現：血清循環miR-139-5p表達降低的程度可反映肝癌轉移進展程度；過表達miR-139-5p後可逆轉肝癌細胞EMT；並證實FAK為miR-139-5p靶基因。我們的結果表明miR-139-5p通過靶向抑制FAK，從而抑制肝癌EMT。這為確立miR-139-5p作為抗肝癌EMT的靶點治療提供科學依據和理論基礎。
