miR-663在肝癌細胞增殖中的作用及分子機制研究

《miR-663在肝癌細胞增殖中的作用及分子機制研究》是依託中山大學，由雲徑平擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：miR-663在肝癌細胞增殖中的作用及分子機制研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：雲徑平
• 依託單位：中山大學

中文摘要

肝細胞癌惡性度高，預後差，其發生髮展機制尚未明了，越來越多的研究表明，microRNA在肝癌的惡性進程中扮演十分重要角色。我們前期觀察到miR-663在人肝細胞癌組織和肝癌細胞株中呈高表達，實驗研究顯示miR-663可以促進肝癌細胞增殖和G1/S期轉換，並初步證實p21WAF1/CIP1為miR-663的直接靶基因。為此，我們首次提出miR-663靶向調控p21WAF1/CIP1並參與肝癌細胞增殖和周期調控的新機制。本項目擬採用一系列研究方法，在基因表達調控、細胞功能、動物模型及人體肝細胞癌病例中探討miR-663與p21WAF1/CIP1在人肝癌中的作用及其在肝癌細胞增殖和周期調控中的分子機制，並研究miR-663的轉錄調控機制,從而獲得miR-663在肝癌中的作用及其參與肝癌細胞增殖和周期調控的可靠證據，為詮釋肝細胞癌發生髮展的分子機制和尋找治療新靶點提供有力的科學依據。

結題摘要

越來越多的研究表明，microRNA在肝癌的惡性進程中扮演十分重要角色，它在腫瘤發生髮展中的作用及意義尚未清楚。我們前期套用microRNA晶片在不同腫瘤組織和細胞株中進行高通量檢測，發現幾個表達差異明顯的microRNA，如miR-137、miR-625、miR-663和miR-720等。原申請基金計畫研究miR-663靶向調控p21WAF1/CIP1並參與肝癌細胞增殖和周期調控的新機制，但由於我們已報導了鼻咽癌中miR-663靶向p21WAF1/CIP1的分子機制研究，繼續在肝細胞癌中研究創新性不足。因此，我們改變原有計畫，轉而研究其他microRNA（miR-137和miR-625），研究重點調整為miR-137和miR-625對肝細胞癌發生髮展過程的影響。我們首先發現miR-137和miR-625在肝細胞癌中的表達降低，其低表達與淋巴結及遠處轉移、門靜脈癌栓、TNM分期及患者預後差相關，miR-137和miR-625在門靜脈癌栓中的表達較原發灶明顯下調。體內及體外實驗證實過表達miR-137和miR-625抑制肝癌細胞增殖和/或遷移和侵襲，機制上分別是miR-137直接調節AKT2抑制肝癌細胞增殖及遷移作用，miR-625通過靶向調控IGF2BP1參與PTEN/HSP27信號通路發揮作用。同時，AKT2與miR-137、IGF2BP1與miR-625在肝癌組織及細胞株中的表達量呈負性相關，其中IGF2BP1在肝癌組織中的高表達與患者預後差相關。抑制AKT2可產生類似過表達miR-137的作用功能，同時上調肝癌細胞缺失3’-UTR的AKT2質粒可逆轉miR-137抑制肝癌細胞增殖、遷移和侵襲的功能，相似的結果可見於miR-625的rescue實驗。以上結果示miR-137和miR-625在肝癌中扮演著抑制轉移microRNA的角色，同時分別詮釋了miR-137/AKT2/mTOR、miR-625/ IGF2BP1/PTEN在肝癌惡性進程中作用及其分子機制，並可作為肝細胞癌診斷和治療的潛在靶點。此外，在本項目經費資助下，我們還進行了miR-720抑制乳腺癌侵襲作用機制以及PKM2、Fibulin-3、SIRT3等蛋白在肝細胞癌中的表達及臨床意義的研究。