Elmo1誘導上皮-間質轉化促進肝癌細胞侵襲轉移的機制研究

《Elmo1誘導上皮-間質轉化促進肝癌細胞侵襲轉移的機制研究》是依託中山大學，由沈順利擔任項目負責人的青年科學基金項目。

基本介紹

• 中文名：Elmo1誘導上皮-間質轉化促進肝癌細胞侵襲轉移的機制研究
• 項目類別：青年科學基金項目
• 項目負責人：沈順利
• 依託單位：中山大學

中文摘要

上皮-間質轉化（EMT）是腫瘤侵襲和轉移的重要機制。我們前期採用雙向電泳-質譜分析發現肝癌組織中Elmo1表達增加；Elmo1高表達能夠增強肝癌細胞侵襲能力且伴有明顯的EMT現象（E-cadherin下調，Vimentin上調），PI3K通路抑制劑可逆轉該效應。我們推測Elmo1可能通過激活PI3K/AKT信號通路誘導EMT促進肝癌進展。本項目擬首先通過臨床標本分析Elmo1和EMT的相關性；其次觀察Elmo1對肝癌細胞EMT及侵襲和轉移等生物學行為的影響，並進一步檢測該過程中PI3K/AKT信號通路主要成員及下游靶基因表達水平的變化；然後採用動物模型證實Elmo1通過激活PI3K/AKT信號通路誘導EMT促進肝癌侵襲和轉移；最後通過臨床標本和細胞實驗證實Elmo1表達上調受相關lncRNA的調控。本項目旨在闡明Elmo1誘導EMT促進肝癌侵襲和轉移的分子機制，為治療肝癌提供新的作用靶點。

結題摘要

我們前期研究表明Elmo1有可能通過上皮-間質轉化（EMT）機制促進肝細胞癌（HCC）的侵襲、轉移。我們首先構建了組織晶片對263對肝癌組織及癌旁組織進行免疫組化檢測，發現Elmo1肝癌組織中表達高於癌旁組織，Elmo1高表達的肝癌患者其1、3、5年生存率分別為64.6%、 39.9% 和33.1%；低表達的肝癌患者1、3、5年生存率分別為77.1%、55.2%和49.2%（P=0.008）；而相應的無瘤生存期（DFS）分別為39.5%、25.5% 和50.5%、39%、34.1%（P=0.029）。繼而我們構建了Elmo1過表達和下調錶達的慢病毒載體並穩定轉染了肝癌細胞株MHCC97L和MHCC97H。通過qRT-PCR、Western blotting、免疫螢光等方法，我們證實Elmo1上調錶達後能夠增加肝癌細胞MHCC97L的遷移、侵襲、克隆形成能力，伴有E-cadherin下調和N-cadherin上調；而下調Elmo1則能夠降低MHCC97H細胞的遷移、侵襲、克隆形成能力，伴有E-cadherin的上調和N-cadherin的下調。進一步我們通過裸鼠皮下肝癌模型和肝臟原位腫瘤模型證實Elmo1能夠增強肝癌細胞的增殖能力，促進腫瘤細胞的轉移。通過基因晶片檢測，我們發現Elmo1上調後的肝癌細胞PI3K/Akt信號通過活化明顯，進一步通過Western Blotting、免疫螢光燈實驗證實了Elmo1可以通過該通路激活Snail轉錄和細胞形態改變，誘發EMT。此外，我們還通過EMT晶片發現Elmo1很可能通過作用於Sox10起到上述作用，並通過細胞實驗證實了上述假設。本項目證實了Elmo1可通過調控Sox10/PI3K/Akt信號通路誘導EMT，促進肝癌侵襲和轉移，為治療肝癌提供新的作用靶點。