《EphA2調控Hippo信號通路促進胃癌侵襲轉移的機制研究》是依託中南大學，由陳子華擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：EphA2調控Hippo信號通路促進胃癌侵襲轉移的機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳子華
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
上皮-間質轉化 (EMT) 是腫瘤侵襲轉移的關鍵事件。EphA2 和Hippo通路在調控EMT 和腫瘤侵襲轉移中均發揮重要作用，Hippo與Wnt通路之間存在複雜的相互作用。但EphA2 和Hippo通路是否關聯，以及EphA2是否介入Hippo-Wnt的相互作用不清楚。我們前期研究提示，EphA2 可能通過Hippo通路調控胃癌細胞EMT和侵襲轉移。為此，項目擬研究EphA2對胃癌細胞Hippo 通路活性的影響；探索EphA2與YAP/TAZ 競爭性結合14-3-3 蛋白，抑制Hippo 通路活性並介入Hippo-Wnt通路相互作用的分子機制；分析EphA2 是否通過抑制Hippo 通路，誘導EMT，促進胃癌細胞侵襲轉移。項目首次探討EphA2作為Hippo通路上游因子的可能性，不僅可闡明EphA2調控Hippo通路促進胃癌侵襲轉移的機制，而且有望為胃癌的靶向治療提供新策略。
結題摘要
胃癌侵襲、轉移以及復發是影響進展期患者生存期的主要因素。本課題組致力於研究EphA2介導的胃癌侵襲轉移。本項目通過研究發現EphA2-YAP信號通路是在胃癌侵襲轉移以及耐藥過程中發揮重要作用。首先，通過慢病毒/質粒轉染胃癌細胞株，獲得穩定傳代的EphA2過表達/沉默表達的胃癌細胞株。通過一系列生物功能學實驗發現，EphA2表達促進胃癌細胞、增殖以及轉移，同時通過細胞蛋白質組學測序發現，EphA2在胃癌細胞中與YAP結合，同時，co-IP實驗證實了這一現象。YAP作為Hippo信號通路的核心組件，一系列由Hippo上游信號分子或非Hippo通路信號分子調控的YAP的入核，被認為是Hippo通路介導細胞增殖侵襲的重要事件，是近年來研究的熱點。通過研究EphA2過表達/沉默表達的胃癌細胞株發現，EphA2通過直接磷酸化激活YAP，從而抑制YAP降解，促進YAP入核，從而發揮生物學功能。其次，通過耐藥實驗發現EphA2過表達促進胃癌細胞耐受5-FU。同時，發現5-FU能阻斷YAP表達以及入核從而抑制腫瘤細胞生長，Verteporfin能協同5-FU而抑制YAP生物學功能。我們在以免疫缺陷小鼠的動物模型中，進一步證實了EphA2-YAP這一信號通路在介導胃癌細胞增殖侵襲轉移的作用。結合臨床，我們課題組收集了2016-2017年於湘雅醫院行胃癌根治手術患者病理標本以及臨床病理學資料，通過免疫組化實驗和臨床病理學資料分析發現，EphA2表達與YAP和pYAP表達正相關，且EphA2、YAP表達與胃癌患者早期復發相關。本研究表明，在胃癌細胞中，EphA2-YAP信號通路促進細胞增殖侵襲、轉移以及耐藥形成，同時，抑制EphA2-YAP通路能有效降低胃癌細胞耐受5-FU，可作為胃癌患者，特別是耐5-FU胃癌患者的治療胃癌提供新的分子靶點。
