《PHF6在結直腸癌轉移中的作用及機制》是依託北京大學，由易霞擔任負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PHF6在結直腸癌轉移中的作用及機制
- 項目負責人：易霞
- 依託單位：北京大學
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
結直腸癌是嚴重威脅人類健康的主要惡性腫瘤之一，全球發病率和死亡率分別位於第三位和第四位。腫瘤轉移是導致結直腸癌患者死亡的主要原因。上皮-間質轉換（EMT）是腫瘤轉移的起始步驟。儘管已有報導PHF6與NURD、PAF1複合體有相互作用，但其在轉錄調控和組蛋白修飾中的作用和機制、其調控靶基因和在結直腸癌轉移中的作用未見報導。我們前期研究發現PHF6和PRC2複合體相互作用，PHF6在結直腸癌中高表達，其下調抑制結直腸癌細胞的侵襲。本課題利用蛋白質親和層析聯合質譜和免疫共沉澱等技術分析PHF6的相互作用蛋白和利用ChIP-Seq技術探求PHF6和PRC2複合體共同調控的靶基因為突破點，深入探討PHF6參與轉錄調控和組蛋白修飾的新機理，探討PHF6在結直腸癌細胞轉移中的作用及分子機制，為進一步認識PHD鋅指蛋白在基因轉錄調控和組蛋白修飾及在結腸癌轉移中的作用奠定基礎，為結直腸癌治療和診斷提供線索。
結題摘要
Börjeson-Forsman-Lehmann syndrome (BFLS)是一種罕見的X染色體連鎖的隱性遺傳疾病。BFLS主要特徵是中等至嚴重程度的智力低下，癲癇，性腺功能低下，代謝功能低下，肥胖並伴有男性乳房發育症，耳朵肥大，腳趾短小等。PHF6定位於X染色體，在脊椎動物中高度保守，其突變被證明與BFLS密切相關，但是對BFLS的致病機理至今未見報導。我們研究發現PHF6與組蛋白甲基化酶EZH2存在相互作用，而EZH2在脂肪分化和乳腺癌發生髮展中起重要作用。通過對GEO資料庫中的RNAseq結果進行分析我們發現PHF6在脂肪分化中基本呈現下降趨勢，並且與EZH2有比較一致的表達形式，通過對小鼠胚胎成纖維細胞系成脂誘導也發現PHF6與EZH2在脂肪分化過程中表達水平都逐漸降低，提示PHF6可能通過招募EZH2所在複合體在脂肪分化中發揮作用。我們對Oncomine等資料庫進行分析及實驗研究也發現PHF6和EZH2都在乳腺癌中高表達，在ER陰性的乳腺癌細胞系中的表達水平整體高於ER陽性的乳腺癌細胞系且與EZH2具有相似的表達特徵。我們也證實PHF6能夠促進乳腺癌細胞系的生長增殖，其機制是通過影響細胞周期G1到S期的進程。進一步我們檢測到PHF6是一個細胞周期相關蛋白，其表達隨細胞周期改變而有所波動，其核仁定位隨細胞周期改變消失。通過免疫共沉澱聯合銀染及質譜測序技術、免疫共沉澱以及GST融合蛋白沉降技術我們發現PHF6能夠與PRC2複合體相互作用，並且敲低PHF6可以導致EZH2下游靶基因Wnt基因表達上調，提示PHF6可能招募PRC2複合體引起組蛋白甲基化修飾改變進而抑制Wnt通路，從而影響脂肪細胞分化和乳腺癌發生髮展。該研究為闡明PHF6在肥胖及乳腺癌發生髮展的生物學作用及機制奠定了理論基礎，為深入研究BFLS的病因及分子機制，為該疾病的檢測、治療及預後提供線索和理論依據。
