《miR-27a下調RXRα通過β-catenin參與結直腸癌發生和轉移的分子機制》是依託中山大學，由韓安家擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-27a下調RXRα通過β-catenin參與結直腸癌發生和轉移的分子機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：韓安家
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
申請者前期研究發現結直腸癌中RXRα低表達和β-catenin高表達；下調RXRα表達可明顯增加結直腸癌細胞中β-catenin的蛋白表達和轉錄活性。但RXRα在結直腸癌組織中低表達的機制尚未見報導。申請者通過生物信息學分析和初步實驗提示miR-27a可能靶向調控結直腸癌中RXRα表達。本課題擬利用臨床結直腸癌組織對miR-27a表達進行動態檢測，探討miR-27a與RXRα表達和結直腸癌發生和侵襲轉移的關係；體內外實驗分別上調和下調結直腸癌細胞miR-27a表達，檢測其對癌細胞生物學行為及RXRα和β-catenin通路活性及下游基因表達的影響；進一步研究miR-27a下調RXRα並調控β-catenin通路的作用模式，探明miR-27a/RXRα/β-catenin信號通路促進結直腸癌發生和轉移的分子機制，為闡明結直腸癌發生髮展機制提供理論和實驗依據，並為結直腸癌基因治療尋找新的靶點。
結題摘要
本項目為闡明miR-27a下調RXRα通過β-catenin參與結直腸癌發生和轉移的分子機制。我們檢測結直腸癌組織中miR-27a-3p 表達及其與RXRα表達和結直腸癌發生和侵襲轉移的關係；探討miR-27a-3p 表達對結腸癌細胞生物學行為及RXRα和β-catenin 通路活性及下游基因表達的影響及其分子機制。結果發現： （1）結直腸癌細胞和組織中mir-27a-3p表達明顯高於正常結腸黏膜上皮細胞和癌旁結腸黏膜組織；結直腸癌組織中mir-27a-3p和RXRα表達存在明顯的負相關性。miR-27a-3p表達與結直腸癌組織分化程度、臨床分期和遠處轉移存在明顯相關性。單因素Cox回歸分析顯示，組織學分化程度、臨床分期、N分期、M分期和miR-27a-3p表達水平是結直腸癌患者的獨立預後因子。多因素Cox回歸分析顯示，臨床分期和miR-27a-3p表達水平是結直腸癌患者的獨立預後因子。 （2）上調或下調結腸癌中miR-27a-3p表達可明顯促進或抑制結腸癌細胞的增殖、克隆、遷移和侵襲能力，並抑制或促進癌細胞凋亡。體內裸鼠動物實驗發現上調結腸癌細胞中miR-27a-3p表達可明顯促進結腸癌移植瘤的生長和肺轉移。 （3）螢光素酶活性實驗提示miR-27a-3p通過靶向結合RXRα-mRNA影響RXRα表達。上調SW480細胞中的miR-27a-3p 後，RXRα表達明顯下降，Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白表達顯著上升；下調miR-27a-3p的基礎上敲低RXRα後，Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白表達上調，提示敲低RXRα可部分逆轉HCT116細胞下調miR-27a-3p後引起的RXRα上調和Wnt/β-catenin信號通路相關蛋白的下調。研究結果為闡明miR-27a-3p通過抑制RXRα而激活Wnt/β-catenin通路繼而促進結直腸癌的發生髮展機制提供了重要實驗依據。
