《黑木耳液體菌種生產技術規程》是2020年01月20日實施的一項行業標準。
基本介紹
- 中文名：黑木耳液體菌種生產技術規程
- 外文名：Production Technical Practice for Liquid Spawn of Auricularia auricula
- 標準編號：T/FSSJ SYNY001—2020
- 發布日期：2020年01月20日
- 實施日期： 2020年01月20日
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起草人
鄒存兵、趙鎧、朱巍巍、張忠偉、陳飛、黃雲松、李瑩瑩、孫凱、劉東旭、劉 芳岑、盛金、王俊超。
起草單位
遼寧三友農業生物科技有限公司、遼寧省微生物科學研究院、遼寧省食用菌協會。
適用範圍
本標準規定了黑木耳液體菌種生產的基本要求，主要包括生產場地、廠房和布局、設施設備、生產工藝流程、質量要求、技術要求、生產記錄與存檔、菌種貯藏。本標準適用於黑木耳液體菌種的生產。
主要內容
生產工藝流程
母種→搖瓶液體種
↓
培養料配製→投料→滅菌→冷卻→接種→培養→發酵罐液體種
培養基
母種培養基使用附錄A中A.1規定的馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養基（PDA）或A.2規定的綜合馬鈴薯葡萄糖
瓊脂培養基（CPDA）。
液體種培養基根據黑木耳品種及當地原料的要求使用適宜配方（見附錄B），嚴格掌握初始pH。 8 母種
母種繼代培養後須按NY/T 1846 規定抽樣，並進行感官檢驗和菌絲微觀特徵檢驗，合格菌種進入生
產流程。母種質量要求符合GB 19169及NY/T 1742 關於母種質量的規定。
搖瓶液體菌種生產
1 培養基分裝及滅菌
搖瓶液體種培養基裝量為容器體積的1/4至1/3，分裝後立即滅菌。按常規高壓蒸汽滅菌鍋操作規程，
0.1Mpa～0.12Mpa（121℃～126℃），維持25min。
滅菌後的搖瓶液體種培養基於30℃±1℃ 培養箱恆溫培養48小時後，觀察確認無混濁、無異味，可
用於接種培養。
2 接種
按無菌操作規程，將母種斜面菌絲體切割成2mm～4mm顆粒，移入搖瓶培養基中，每100 mL液體培養
基接種菌絲體顆粒1顆～3顆。
3 培養
菌種培養溫度26℃±1℃，空氣相對濕度55%～65%，避光振盪培養。往復式搖床振盪頻率60次～120
次/分， 旋轉式搖床振盪頻率150轉～180轉/分。每日檢查生長狀態，及時檢出渾濁、異味、泡沫異常
的不合格菌種。
搖瓶靜置1分鐘後，菌絲球體積占比液體培養基體積的4/5以上，可結束培養。
發酵罐液體菌種生產
1 空氣過濾系統檢查
使用前要拆分檢查濾芯，要求無油污、料污、無破損，外殼內外壁要求無污物、光亮潔淨。
濾芯在額定風量下，對粒徑0.1～0.2μm粒子的過濾效率大於99.99%，空氣阻力低於280pa。
2 發酵罐檢查與清洗
檢查罐上全部閥門、安全閥、壓力表、要求完好，工作正常。對罐體內、外和全部閥門用流水進行
沖洗，達到無死角、內壁無任何培養料殘餘物的潔淨程度。
3 空消滅菌
發酵罐初次使用、出現染菌、長期放置及更換品種時，應進行空消滅菌。有內置電加熱棒的培養器
加水至容積的80%加熱至121℃，維持40min。用外源蒸汽滅菌的培養器，蒸汽壓力達到0.1Mpa～0.12Mpa
（121℃～124℃），維持40min。
4 投料定容
將配製好的培養基材料攪拌均勻，倒入或用泵抽入發酵罐中，加水定容至所需體積。培養基投料總
量為罐體總容積的70%～80%。
5 滅菌和冷卻
按高壓蒸汽滅菌方法操作，培養器內壓力達到0.1Mpa～0.12Mpa，培養基溫度達到121℃～124℃、
保持時間60 min～90 min。
滅菌結束將培養基降溫至24℃～28℃。降溫過程中要及時向培養器內補充過濾空氣，防止罐壓回零。
6 接種
利用火焰保護接種，接種量為罐內培養基總量的0.1%～0.5%。
7 培養
發酵罐通風量每分鐘1：0.5～1.2 V／V(料液體積／空氣體積)，調節罐壓保持在0.02 Mpa～0.04
Mpa，培養溫度調節在24℃～26℃，培養7d～10d可達到香菇液體菌種成品標準。特殊品種根據特殊需求
具體設定。
8 檢測和判定
培養開始3d後每日從發酵罐中取出樣品進行檢測。按照NY/T 1846 中菌絲微觀特徵、細菌黴菌檢驗
方法檢驗，如異常則排空罐內培養物，空消，重新生產。
發酵終 pH 4.5-5.5，每100ml液體菌種菌絲乾離心後重量2.0～2.8g/100ml。合格黑木耳液體菌種
球狀菌絲體呈白色，濾液呈淡黃色。菌液稍粘稠，有大量球狀菌絲體懸浮、分布均勻、菌球濃白清晰，
有黑木耳液體菌種培養時特有的香氣，無異味。
9 貯藏
成品液體菌種應及時套用。
特殊情況下，培養結束後在發酵罐內通入無菌空氣，保持罐壓0.02Mpa～0.04Mpa，環境溫度6℃～
10℃，可保存24h。
