《骨橋蛋白OPN對肝再生中肝細胞增殖的作用研究》是依託河南師範大學，由王改平擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：骨橋蛋白OPN對肝再生中肝細胞增殖的作用研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：王改平
- 依託單位：河南師範大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
骨橋蛋白（OPN）通過促進炎症反應、細胞增殖或遷移而參與多種肝病的發生，但作為急性期蛋白、炎性細胞因子的OPN是否參與促進肝再生中的細胞增殖缺乏研究。前期工作發現OPN具有顯著促肝再生作用。而肝細胞是部分肝切除（PHx）後動員的主要細胞，活化的肝細胞也能表達、分泌大量OPN，目前研究表明NKT細胞、中性粒細胞、肝星形細胞等是OPN的靶細胞。因此，肝細胞是不是OPN的靶細胞，OPN能否調控肝細胞的增殖和生存，進而調控肝再生值得深入研究。為此，本課題擬在體外考察增加和減少外源性OPN、上調和下調內源性OPN的表達對原代肝細胞增殖的影響，在體內以OPN-/-小鼠為對象從整體水平上研究OPN缺失對PHx後肝細胞增殖、肝再生的作用。本課題試圖闡明OPN對再生肝中肝細胞增殖的調控機理，為尋找新的安全的刺激肝再生的治療藥物提供實驗依據，為未來可能利用OPN提高肝病基礎疾患下的肝再生能力奠定基礎。
結題摘要
作為急性期蛋白、炎症反應調節因子的骨橋蛋白(OPN)除與肝臟疾病的發生關係密切外，可能也參與肝再生，促進受損肝臟細胞的自我修復。而肝細胞是肝再生中動員的主要細胞，因此OPN能否有效地作用於肝細胞，並影響肝再生尚不清楚。本項目首先藉助大鼠Rat Genome 230 2.0 Array及IPA分析、預測了OPN信號通路在轉錄水平上對再生肝的調控，發現5條途徑均被激活，但ERK1/2通路可能發揮較重要作用；進一步檢測、分析發現細胞增殖、活化、炎症和趨化等活動在肝細胞、陷窩細胞、卵圓細胞和膽管上皮細胞中顯著增強。體外以大鼠BRL-3A肝細胞為研究對象，通過慢病毒介導和siRNA方法改變內源性OPN的表達水平，發現OPN可通過ERK1/2，PI3K/AKT和JAK/STAT3通路調控靶蛋白CCND1，BCL2和BAX的表達而促進肝細胞增殖和生長。進一步以大鼠原代肝細胞為研究對象，以腺病毒介導的方法改變內源性OPN的表達水平，同樣發現OPN對原代細胞增殖和活力具有明顯的正調控作用。後又通過尾靜脈注射方法將OPN表達質粒及其干擾質粒注入大鼠再生肝，發現內源性OPN能促進肝再生中的炎症反應和細胞增殖，卻抑制細胞凋亡。此外，通過添加rOPN及中和性抗體檢測外源性OPN含量變化對BRL-3A細胞的影響，結果與內源性改變OPN表達的效果較一致。接著通過尾靜脈注射方法檢測外源性OPN改變對大鼠肝再生的體內影響。上述結果充分證明OPN可以靶作用於肝細胞，促進肝細胞的增殖和活化，此結果有助於了解再生肝的細胞增殖調控機理，進而為提高肝臟疾病基礎疾患下肝臟的再生能力提供理論基礎，對治療肝臟疾病藥物的開發具有顯著的理論意義和臨床價值。
