《CT抗原基因FATE/BJ-HCC-2在肝癌細胞轉移中的作用和分子基礎》是依託鄭州大學，由楊小昂擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：CT抗原基因FATE/BJ-HCC-2在肝癌細胞轉移中的作用和分子基礎
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊小昂
- 依託單位：鄭州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
FATE/BJ-HCC-2是我們採用生物信息學方法發現並驗證的一種新的CT(cancer testis, CT)抗原基因(Genbank AY101182)。前期研究發現該基因的表達與肝癌的分化程度有關，具有促進肝癌細胞增殖的作用，在肝癌的發生髮展過程可能有重要作用。為進一步研究它在肝癌細胞轉移中的作用，我們擬採用SiRNA基因沉默、雷射共聚焦顯微鏡、基因晶片、定量PCR等技術和建立的穩定轉染FATE／BJ-HCC-2的肝癌細胞系單克隆細胞株進行體外和動物體內試驗，觀察FATE/BJ-HCC-2表達對腫瘤細胞骨架結構的影響，研究與FATE/BJ-HCC-2相互作用的基因和分子，分析FATE/BJ-HCC-2促進腫瘤細胞轉移的分子機制，探討FATE／BJ-HCC-2表達與肝癌細胞轉移的關係, 進一步明確FATE/BJ-HCC-2的生物學功能, 對於揭示腫瘤發病機理和發生髮展過程具有重要意義。
結題摘要
FATE/BJ-HCC-2是我們採用生物信息學方法發現的一種新的CT抗原基因。我們建立了穩定表達FATE／BJ-HCC-2的肝癌細胞系Bel-7402的單克隆細胞株。前期研究結果顯示，FATE／BJ-HCC-2基因的表達具有促進細胞增殖能力。為進一步研究FATE/BJ-HCC-2在肝癌細胞轉移中的作用，我們進行了以下研究並取得研究進展和成果：（1）我們採用雷射共聚焦顯微鏡對穩定轉染FATE/BJ-HCC-2的肝癌細胞系細胞及空質粒轉染的對照組細胞的骨架結構進行了觀察，發現兩組腫瘤細胞的微管和微絲改變及細胞形態的差異，提示FATE/BJ-HCC-2表達促進腫瘤細胞侵潤和轉移存在細胞骨架結構基礎。（2）採用基因沉默技術研究發現FATE/BJ-HCC-2表達能夠增強腫瘤細胞的遷移和侵襲能力，且這種作用能夠被特異性的SiRNA所阻斷。阻斷骨橋蛋白（OPN）和整合素連線激酶（ILK）表達後，FATE/BJ-HCC-2轉染的肝癌細胞的侵襲和遷移能力也受到抑制。（3）利用基因晶片技術對表達FATE/BJ-HCC-2基因的5B4細胞和對照組MOCK細胞進行了人全基因組差異表達分析，上調差異表達基因共有821個，下調差異表達基因共有873個。從中篩選出一些與腫瘤轉移及細胞骨架相關的分子。（4）採用免疫組化方法檢測了FATE/BJ-HCC-2轉染肝癌細胞和對照組Mock細胞及其在動物體內現成的腫瘤組織中與細胞骨架及轉移相關基因蛋白的表達。發現促進腫瘤轉移的相關分子如ILK、OPN、β-Catenin、MMP-2、MMP-9蛋白在FATE/BJ-HCC-2表達細胞及其在體內形成的腫瘤組織中的表達相對高於在Mock細胞及其在體內形成的腫瘤組織中表達；而抑制腫瘤轉移的相關分子如E-Cadherin蛋白在FATE/BJ-HCC-2表達細胞中的表達則相對低於在Mock細胞中表達。以上研究結果提示FATE/BJ-HCC-2表達可能在腫瘤細胞的生長及轉移過程中起重要作用。FATE/BJ-HCC-2表達影響了肝癌細胞的細胞骨架及轉移相關基因蛋白的表達，FATE/BJ-HCC-2表達增強腫瘤細胞的侵襲和轉移能力具有分子基礎。該研究對於揭示FATE/BJ-HCC-2的生物學功能及腫瘤發病機理具有重要意義。我們按照課題計畫完成了該課題的研究。
