《骨橋蛋白在子宮內膜的表達調節及對蛻膜化功能的影響》是依託武漢大學，由謝青貞擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：骨橋蛋白在子宮內膜的表達調節及對蛻膜化功能的影響
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：謝青貞
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
蛻膜化是胚胎著床及早期胚胎存活所必需的，其典型特徵是子宮內膜基質細胞的增殖和分化，同時伴隨著新生血管形成，蛻膜化缺陷可導致著床失敗或不良妊娠結局。骨橋蛋白(OPN)是一種多功能的細胞外基質糖蛋白，研究提示OPN與子宮蛻膜化和胚胎生長發育有關，但機制還不清楚。本項目擬建立人子宮內膜基質細胞體外誘導蛻膜化模型和小鼠體內、體外研究模型，採用RNA過表達和干涉技術，結合生物信息學算法，利用啟動子分析、染色質免疫共沉澱和靶基因驗證等方法，研究在著床和蛻膜化過程起重要作用的轉錄因子cAMP反應元件結合蛋白、CCAAT增強子結合蛋白β以及Micro RNA181a/b對子宮內膜OPN表達的調節，並探討OPN在子宮內膜容受性的建立、蛻膜化、血管形成及在胚胎髮育的功能。研究結果將有助於了解胚胎著床的分子機理。
結題摘要
胚胎著床之後，子宮內膜基質細胞會發生廣泛的增殖和分化，同時伴有免疫細胞的聚集和血管形成，稱之為蛻膜化反應。蛻膜化異常可導致胚胎著床失敗、胎盤功能異常和不良妊娠結局。我們的前期研究結果發現骨橋蛋白（OPN）在小鼠胚胎著床位點及蛻膜組織中高表達，提示OPN可能參與了子宮蛻膜化過程，但OPN在人子宮內膜蛻膜化過程中的功能尚不清楚。本項目在前期結果的基礎上，進一步深入研究了OPN在人子宮內膜和早期妊娠蛻膜組織中的表達、調節和功能。OPN在分泌期子宮內膜和早孕蛻膜組織的表達明顯高於增殖期，結合microRNA靶基因預測軟體TargetScan，我們發現人OPN基因3’UTR區域存在miR-181a/b的結合位點，檢測結果也顯示miR-181b在子宮內膜中的表達與OPN的表達呈負相關。OPN在蛻膜化的人子宮內膜基質細胞（hESC）中高表達，而miR-181b表達下調。cAMP處理可誘導hESC中OPN表達，並通過CREB/CEBPβ信號通路對OPN的表達進行轉錄調控。過表達miR181b可抑制hESC中OPN的表達，轉染Sponge-miR-181b可促進OPN的表達。體外敲低hESC中OPN的表達後，蛻膜化標誌分子IGFBP-1和PRL表達下降，同時血管形成相關分子VEGFA和VEGFR2表達下降。為了驗證OPN在人胚胎著床蛻膜化中的重要意義，我們收集了進行IVF治療女性前一個周期的子宮內膜組織。根據胚胎移植後的臨床妊娠結局分為成功妊娠組和著床失敗組，結果顯示著床失敗組子宮內膜組織中OPN蛋白表達顯著低於成功妊娠組。小鼠模型也證實了OPN在小鼠蛻膜細胞中高表達，抑制OPN的表達後小鼠ESC（mESC）蛻膜化標誌分子Dtprp表達下降，並且mESC的增殖能力受到抑制。以上結果說明OPN可能是調節子宮內膜蛻膜化反應的重要因子，OPN表達或功能異常可能會導致胚胎著床失敗和早期妊娠丟失。OPN在胎盤組織中的高表達提示OPN可能也是胎盤形成和妊娠維持的關鍵分子.，我們將在後續的研究中進一步探討OPN在妊娠維持和病理妊娠中的生理病理意義。
