《骨橋蛋白(OPN)對TLR3/4和RIG-I介導的IFN-β表達的調控作用及機制》是依託山東大學，由高成江擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：骨橋蛋白(OPN)對TLR3/4和RIG-I介導的IFN-β表達的調控作用及機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：高成江
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
I型干擾素在抗病毒感染中發揮重要作用，但其分子調節機制仍不是完全清楚。我們前期實驗發現，LPS和poly(I:C)均可誘導巨噬細胞中骨橋蛋白OPN的表達；OPN缺陷鼠中，LPS和poly(I:C)誘導的IFN-β表達明顯增強，提示OPN可能參與TLR3/4介導的IFN-β表達，但分子機制還不清楚。本研究利用動物模型(OPN缺陷小鼠)、細胞模型(巨噬細胞)和分子技術手段(ChIP、EMSA、免疫共沉澱等)探討OPN在IFN-β表達和VSV病毒感染中的作用及其與Trif、TBK1、IRF3、NF-κB等信號分子的相互作用，以期闡明OPN參與TLR3/4和RIG-I介導的IFN-β表達調控並揭示其可能的分子機制；首次提出OPN的表達可能作為反饋信號調節I型干擾素的產生，為尋找基因轉染防治病毒性疾病免疫調節療法提供新途徑；分析研究OPN的重要功能域，為設計合成以OPN為干預靶點的藥物提供理論依據。
結題摘要
骨橋蛋白(osteopontin, OPN) 又稱為早期T淋巴細胞活化因子1 (early T lymphocyte activation 1, Eta1)，是一種分泌性的多功能糖蛋白。OPN可以調節多種生命活動進程，包括細胞分化、粘附、骨重構、腫瘤發生髮展和免疫反應。長期以來，OPN被認為是一個與炎症過程相關的促炎症細胞因子，具有促進巨噬細胞分泌IFN-γ和IL-12的作用。近年來，隨著胞內形式OPN（intracellular OPN, iOPN）的發現，OPN在不同免疫細胞以及免疫反應的不同階段中的調控作用逐漸引起人們的重視。但OPN特別是iOPN在抗病毒天然免疫中的功能還不清楚，並且在不同研究還存在爭議。本課題利用OPN缺陷型小鼠，通過體內與體外實驗，研究了OPN在抗病毒天然免疫中的調控功能。發現iOPN在機體抵抗病毒感染的過程中，發揮重要的正向調節作用。若OPN缺陷或OPN表達被敲低，都會明顯的抑制病毒感染所誘導的IRF3活化、Ⅰ型干擾素產生以及抗病毒免疫反應，並且相比於野生型小鼠，OPN缺陷型小鼠對於VSV的感染更加敏感，死亡率更高。進一步發現iOPN可以通過其C端結構域結合TRAF3，進而抑制Triad3A所介導的TRAF3的K48連線的泛素化修飾，從而抑制TRAF3的降解，增強抗病毒免疫反應。本研究成果明確了iOPN在抗病毒天然免疫中的調控功能，為I型干擾素表達調控機制提出新的認識，為抗病毒感染藥物研發提供了理論依據。
