《microRNAs在糖尿病視網膜病變模型眼內炎症反應中的調控作用》是依託蘇州大學，由白艷艷擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：microRNAs在糖尿病視網膜病變模型眼內炎症反應中的調控作用
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：白艷艷
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖尿病視網膜病變（DR）是糖尿病重要併發症之一。作為炎性疾病，其發病機制尚不明確。微小RNA（miRNAs）作為基因轉錄後調控因子，在眼底病中的作用了解甚少。有研究顯示DR大鼠模型的視網膜中miRNAs表達異常。我們在氧誘導的視網膜病變小鼠模型中，發現miRNA可通過調控下游靶基因改善視網膜新生血管形成。然而，miRNAs在DR的炎症反應中是否具有調控作用，其機制如何，目前不清楚。因此，本研究擬採用模式動物和miRNAs分析技術篩選DR模型視網膜中顯著下調的miRNAs，用現代分子生物學技術、顯微外科、組織化學與蛋白質技術研究miRNAs在DR炎症反應中的調控作用，並對其中重要的miRNAs進行轉化醫學的研究。本項目將重點闡釋miRNAs與DR模型視網膜血管炎症反應、促炎症因子表達之間的關係，進一步闡明miRNAs在DR炎症反應中的調控機制，並從核酸水平對DR早期防治提出科學依據。
結題摘要
糖尿病視網膜病變（DR）是糖尿病重要併發症之一。作為炎性疾病，其發病機制尚不明確。微小RNA（miRNAs）作為基因轉錄後調控因子，在眼底病中的作用了解甚少。有研究顯示DR大鼠模型的視網膜中miRNAs表達異常。我們在氧誘導的視網膜病變小鼠模型中，發現miRNA可通過調控下游靶基因改善視網膜新生血管形成。然而，miRNAs在DR的炎症反應中是否具有調控作用，其機制如何，目前不清楚。因此，本研究採用鏈脲佐菌素(STZ)注射建立了糖尿病小鼠模型，利用real time RT-PCR技術確定在DR模型視網膜中miR-126與miR-181c顯著降低；採用基因體外重組技術，構建了重組質粒載體pCMV-MIR-126和pCMV-MIR-181c；對糖尿病小鼠行質粒載體pCMV-MIR-126或pCMV-MIR-181c / 脂質體混合物玻璃體內注射，恢復了其眼內miR-126或miR-181c水平；採用顯微外科、組織化學等技術分別檢測糖尿病小鼠玻璃體內注射前、後視網膜微血管白細胞粘附數目、視網膜無灌注毛細血管數目，結果顯示玻璃體內注射組小鼠視網膜微血管白細胞粘附數目、視網膜無灌注毛細血管數目較未注射組均顯著減少；利用生物信息學分析顯示，miR-181c可與促炎症因子IL-6、TNF-α的3’-UTR序列結合，miR-126可與VCAM-1序列結合；Western-blotting結果進一步證明恢複眼內miR-181c或 miR-126水平可顯著降低眼內IL-6、TNF-α或VCAM-1過表達。本研究證實miRNAs對促炎症因子的表達在轉錄水平具有重要調控作用，保證DR模型鼠眼內的miRNAs正常水平對DR模型視網膜血管炎症反應的改善具有重要意義，也為採用核酸玻璃體內注射對DR早期防治提出了科學依據。此外，還開展了《胰島素對糖尿病血栓形成的影響》的相關研究，結果顯示：胰島素對凝血酶誘導的血小板聚集與ATP釋放具有劑量依賴的增強作用；可通過與血小板表面胰島素受體（IR）結合，經PI3K、Akt、GSK3β、sGC等信號途徑促進血小板活化；可促進凝血酶誘導的血小板表達P-選擇素，具有時間依賴性；還可促進VEGF、PDGF、Endostatin在凝血酶誘導的血小板中高表達，並呈劑量依賴性。該部分研究暗示胰島素治療或加劇糖尿病患者血栓形成，對於DR的影響有待於下一步繼續研究。
