轉移相關蛋白3調控食管鱗癌轉移起始的分子機制

《轉移相關蛋白3調控食管鱗癌轉移起始的分子機制》是依託汕頭大學，由張灝擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：轉移相關蛋白3調控食管鱗癌轉移起始的分子機制
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：張灝
• 依託單位：汕頭大學

項目摘要

轉移是我國高發惡性腫瘤食管鱗癌致死的主要原因。申請者長期研究的轉移相關蛋白3（MTA3）是核小體重組和去乙醯酶（NuRD）複合物的重要亞基。前期研究發現：①病人標本和細胞培養中MTA3水平與轉移起始關鍵蛋白表達密切相關；②天然藥物單體能夠升高MTA3並抑制轉移起始通路；③轉基因小鼠實驗也表明MTA3調節乳腺癌的浸潤轉移。據此，我們認為MTA3可能是控制食管鱗癌轉移起始的主導基因。本課題擬在原創性前期工作基礎上，①套用細胞培養和活體成像技術, 在體外和體內證明MTA3是控制食管鱗癌轉移起始的開關；②用藥物單體處理細胞和食管鱗癌小鼠模型，進一步在細胞和整體水平證實MTA3控制轉移起始的開關作用；③最後在分子水平探討調節組蛋白去乙醯化是MTA3調控食管鱗癌轉移起始的機制。本課題針對轉移的起始環節，探討引發食管鱗癌轉移的源頭機制，對揭示食管鱗癌轉移的調控機理和開發新的抗轉移藥物具有重要意義。

結題摘要

本項目自立項以來，在基金委的支持下，在本課題組的共同努力下，不僅取得了相應的研究成果（見下文）， 並充分套用這一課題的資助，針對當地食管癌高發的情況（潮汕地區是我國唯一沿海食管癌高發地區），充分發揮病源豐富和課題主持人研究背景的優勢，開展了建庫（建立了食管癌標本庫），建模（建立了食管癌小鼠模型：化學誘導結合基因敲除技術）和建隊伍（建立了以本課題為中心的食管癌研究隊伍，其中一人已經在本課題基礎上獲得一項國家自然科學基金）。申請人根據原計畫套用體外細胞培養和臨床標本證明了MTA3在調節食管鱗癌轉移中起重要作用。在研究過程中又有新的發現：MTA3不僅調節轉移浸潤，也對細胞增殖生長有作用，且通過與以往不同的分子通路。在研究過程中，發現MTA3食管癌轉移調控的路徑中，可能有別於乳腺癌，通過其它新的通路調控腫瘤轉移。具體成果包括：1. 建立數個MTA3穩定過表達和敲除的食管鱗癌細胞株，研究MTA3表達上調或下調對腫瘤細胞侵襲能力、細胞活力、克隆形成能力和非錨定生長依賴性能力等多個關鍵指標的影響，結果表明MTA3不僅影響腫瘤細胞侵襲能力，還影響細胞存活。2. 從分子水平上闡明了MTA3的抑癌機制，證明了MTA3與數個經典通路或新的信號通路的關係。套用穩定轉染技術，證明在食管鱗癌細胞中過表達MTA3可有效上調細胞周期關鍵基因p21和腫瘤轉移相關基因KLF4等關鍵分子的表達。進一步研究發現了MTA3潛在下游基因還包括了PTPRO和Pak1等。3. 挖掘了MTA3的臨床轉化套用價值。通過藥物實驗，我們發現天然藥物單體EGCG抑制食管癌細胞增殖，且濃度梯度依賴性上調MTA3表達，提示MTA3是EGCG潛在的藥物靶點。4. 證實MTA3可以作為臨床預後與診斷的指標。完成了49例食管鱗癌石蠟包埋組織標本的免疫組化分析，並結合臨床隨訪資料，證明MTA3低表達是食管鱗癌患者不良預後指標。5. 建立了相應的食管鱗癌動物模型。套用4-NQO成功建立了化學誘導食管癌模式小鼠，為進一步深入研究MTA3及其相關基因功能打下堅實基礎。本課題研究成果為抑制食管鱗癌轉移提供了理論基礎，對將MTA3轉化成臨床診斷和治療靶點具有重要指導意義。