《MTA1蛋白在食管鱗癌血管生成過程中的作用機制研究》是依託山東大學，由李樹海擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：MTA1蛋白在食管鱗癌血管生成過程中的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李樹海
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
鱗癌是我國原發性食管癌中最常見的組織學類型，患者的5年生存率仍處於較低的水平。腫瘤血管生成在食管鱗癌的侵襲轉移過程中發揮了極其重要的促進作用，因此，研究血管生成的分子機制有望為食管鱗癌的治療帶來突破。近年來的研究表明腫瘤轉移相關蛋白1（MTA1）與人類多種惡性腫瘤的血管生成密切相關，並能通過調控VEGF-A等下游分子來調節腫瘤血管生成，提示MTA1蛋白可能是一個潛在的促進惡性腫瘤血管生成的關鍵分子，已被錨定為抗腫瘤血管生成治療的新靶點。我們前期的研究首次證實MTA1蛋白在食管鱗癌組織中存在高表達，並與血管生成密切相關，但其具體的信號調控機制尚不明確，為進一步的分子機制研究及以MTA1蛋白為靶點的治療研究打下了良好的前期基礎。本研究將通過體內、外實驗深入系統的探討MTA1蛋白調控食管鱗癌血管生成的具體分子機制，以期為臨床靶向治療食管鱗癌提供新的思路和理論依據。
結題摘要
腫瘤血管生成是一個極其複雜的動態過程，涉及體內多種細胞並受多因子不同層次的調控。本研究的結果表明MTA1蛋白調控食管鱗癌裸鼠移植瘤血管生成的作用較弱，提示MTA1蛋白可能為一種下游的血管生成調節因子，而不是調控食管鱗癌血管生成相關因子的關鍵分子之一。由於實驗結果顯示MTA1蛋白表達與裸鼠移植瘤的生長增殖能力顯著相關，遂對MTA1蛋白調控食管鱗癌裸鼠移植瘤的增殖機制進行相關的研究。主要研究內容：利用Affymetrix公司的高通量人基因表達譜晶片對KYSE410細胞裸鼠移植瘤進行差異表達基因的篩選，分析的結果顯示共有779個基因的表達水平具有顯著性差異，其中352個基因的表達水平顯著上調，427個基因的表達水平顯著下調；對篩選出的779個差異表達基因進一步進行Pathway富集分析及Gene Ontology（biological process, cellular component, molecular function）分析，結合Pubmed檢索結果，從中篩選出30個尚未在食管鱗癌中報導的差異基因；針對每個基因設計3個RNAi靶點，並將攜帶不同靶點的3個質粒等比例混合進行慢病毒包裝，從而確保目的基因的敲減效率；使用高內涵篩選的方法，通過比較基因敲減對KYSE410細胞增殖速度的影響，初步篩選出增殖抑制表型明顯的基因SPRED1和KDM1B；對篩選出的SPRED1基因進行RNAi後，KYSE410細胞的增殖速率受到顯著抑制、處於G1期的細胞顯著減少、處於S期的細胞顯著增多、細胞的凋亡數顯著增多、克隆形成能力顯著降低、增殖能力顯著減緩，提示SPRED1基因與KYSE410細胞的增殖能力顯著相關。綜上所述，MTA1蛋白參與調控了KYSE410細胞裸鼠移植瘤內多種基因的表達，通過調控其下游基因SPRED1發揮對食管鱗癌KYSE410細胞的增殖調控作用。進一步研究MTA1蛋白調控SPRED1基因表達的分子機制及以MTA1蛋白為靶點，針對其信號傳導通路的干預治療可能有利於控制食管鱗癌細胞的增殖能力，從而為食管鱗癌的臨床治療提供新的思路。
