《MicroRNA對舌鱗癌侵襲轉移的調控作用研究》是依託中山大學，由李勁松擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MicroRNA對舌鱗癌侵襲轉移的調控作用研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李勁松
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
本課題組前期已經篩選獲得不同臨床分期舌鱗癌的miRNA表達譜，並挑選了其中高表達的miR-21為對象，在細胞和動物模型中證實了miR-21對舌鱗癌增殖和凋亡的調控作用。鑒於局部侵襲、淋巴結和遠處轉移是舌癌療效不佳和患者死亡的主要原因，為探討miRNA對舌鱗癌侵襲轉移的調控作用，本項目將從前期獲得的表達譜中挑選數個顯著差異的miRNA在臨床N0和N1舌癌標本中再驗證，獲得侵襲轉移相關的候選miRNA，再通過轉導miRNA擬似物或其抑制分子，干預舌鱗癌細胞內的miRNA水平，在細胞摸型中觀察對癌細胞侵襲、遷移能力的影響和對EMT的調控作用，並在動物體內觀察腫瘤侵襲轉移能力以及腫瘤血管淋巴管生成的改變，同時檢測相關靶基因表達變化。通過本研究確定幾個與舌鱗癌侵襲轉移相關的miRNA，為闡明miRNA調控舌鱗癌侵襲轉移機制提供新切入點，並為研製針對舌鱗癌侵襲轉移特性的miRNA靶向藥物提供實驗依據。
結題摘要
本項目以臨床上頭頸惡性腫瘤化療一線藥物順鉑，誘導建立了舌鱗癌細胞株CAL27、SCC25的耐藥細胞株CAL27-res、SCC25-res，採用miRNA晶片技術，初步分析了舌癌細胞與舌癌順鉑耐藥細胞miRNA 表達譜的差異，並以qRT-PCR進行驗證，發現耐藥細胞中miR-200b和miR-15b表達下調最明顯，而且細胞與細胞之間連線消失，呈現間質表型，E-cadherin表達下調，Vimentin，N-cadherin表達上調，侵襲遷移能力增加。而升高miR-200b或miR-15b表達，CAL27-res和SCC25-res細胞的間質特性被逆轉，侵襲遷移能力降低，對順鉑敏感性增加；同時高表達miR-200b和miR-15b，作用更明顯。敲低miR-200b或miR-15b，CAL27和SCC25向間質表型轉化，侵襲遷移能力增加，對順鉑的抗性增加。miR-200b和miR-15b的靶基因BMI1在CAL27-res細胞中表達升高，高表達miR-200b或miR-15b，BMI1表達降低，螢光素酶活性也降低。CAL27-res移植瘤在小鼠體內發生肝肺轉移，而CAL27移植瘤無轉移，高表達miR-200b或miR-15b，顯著抑制CAL27-res移植瘤的轉移能力，而對移植瘤的生長無明顯影響。與化療敏感的舌鱗狀細胞癌樣本相比，化療抗性的腫瘤樣本中，miR-200b和miR-15b表達低，BMI1表達高；BMI1表達與miR-200b或miR-15b的表達負相關；miR-200b或miR-15b表達水平與病人發生淋巴結轉移，對化療的抗性負相關，而BMI1表達水平與病人發生淋巴結轉移，對化療的抗性正相關。Kaplan-Meier法和log-rank檢驗分析也表明，miR-200b或miR-15b表達水平高的病人總生存率高於表達低的病人，而BMI1表達水平低的病人總生存率高於表達高的病人。對照研究工作計畫，我們已經完成預定的研究內容，並達到預期成果，在國內外重要刊物上發表了研究論文，SCI論文方面，《Oncogene》發表1篇，中文核心期刊發表2篇。人才培養方面，已培養博士研究生1名（孫麗娟），碩士研究生1名（林釗宇）。
