《甘草查爾酮A抑制口腔鱗癌細胞轉移的關鍵分子鑑定》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由曾光擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：甘草查爾酮A抑制口腔鱗癌細胞轉移的關鍵分子鑑定
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：曾光
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
口腔鱗狀細胞癌轉移是導致患者死亡的主要原因。目前，臨床上仍缺乏特異性抑制鱗癌轉移的藥物。甘草在我國已有數千年的醫藥史，甘草查爾酮A是其主要的藥效成分之一。我們前期的體內外實驗證明：甘草查爾酮A可顯著抑制人鱗癌細胞的遷移、侵襲能力及上皮-間充質轉化，但對正常的口腔黏膜角化細胞的增殖、凋亡及細胞周期無明顯影響。鑒此，甘草查爾酮A可考慮為抑制鱗癌轉移的候選藥物。然而，甘草查爾酮A抑制鱗癌轉移的分子靶不清。我們擬首先用親和純化、質譜鑑定、解離常數測定及螢光共定位等手段，篩選並確定鱗癌細胞中與甘草查爾酮 A相互作用的關鍵首觸分子；其次採用siRNA沉默及慢病毒過表達等手段，研究該分子對鱗癌細胞遷移、侵襲及上皮-間質轉化等的影響；最後採用體內、外實驗探明甘草查爾酮 A與該分子相互作用對鱗癌細胞轉移的影響。即為鱗癌細胞轉移機制提出新認識，又為闡明甘草查爾酮 A抑制鱗癌細胞轉移的藥物作用靶點提供依據。
結題摘要
口腔鱗狀細胞癌轉移是導致患者死亡的主要原因。目前，臨床上仍缺乏特異性抑制鱗癌轉移的藥物。甘草在我國已有數千年的醫藥史，甘草查爾酮A是其主要的藥效成分之一。我們前期的體內外實驗證明：甘草查爾酮A可顯著抑制人鱗癌細胞的遷移、侵襲能力及上皮-間充質轉化，但對正常的口腔黏膜角化細胞的增殖、凋亡及細胞周期無明顯影響。鑒此，甘草查爾酮A可考慮為抑制鱗癌轉移的候選藥物。本項目探索甘草查爾酮A對人口腔鱗癌細胞自噬活動的影響以及MAP4K3-mTOR信號級聯在甘草查而酮A誘導的人口腔鱗癌細胞自噬與凋亡中的作用。結果顯示：甘草查爾酮 A可劑量及時間依賴地促進SCC-25鱗癌細胞自噬活性，表現為促進其溶酶體及自噬泡的形成、促進其表達自噬調節因子beclin1及LC3，且顯著增高LC3-II/LC3-I的比率（P＜0.05）。未經刺激組SCC-25系細胞基本不表達LC3蛋白，而經50微摩爾甘草查爾酮A刺激後，LC3蛋白表達顯著增強（P＜0.01），且主要表達在胞漿。甘草查爾酮 A可劑量及時間依賴性地降低SCC-25細胞MAP4K3、p-mTOR及p-p70S6蛋白的表達水平，促進其LC3-II、beclin1、caspase-3及caspase-9蛋白表達水平，並抑制其bcl-2蛋白表達水平（P＜0.05）。採用慢病毒過表達MAP4K3後，p-mTOR、caspase-3及caspase-9蛋白表達水平顯著增高，LC3-II、beclin1及bcl-2蛋白表達水平則顯著降低（P＜0.05）。經甘草查爾酮A刺激後，SCC-25細胞早期凋亡數與晚期凋亡數均較對照組顯著增多，該效應可被MAP4K3過表達處理顯著增強（P＜0.05）。結論：甘草查爾酮A可時間劑量依賴地抑制MAP4K3-mTOR信號級聯，並促進人口腔鱗癌細胞的自噬與凋亡，當過表達MAP4K3活化mTOR信號級聯後，鱗癌細胞自噬活動受到抑制，但其凋亡活動則顯著增強。甘草查爾酮 A可作為抑制口腔鱗癌轉移的重要藥物。
