《放射治療誘導肝癌細胞上皮-間質轉化及分子機制研究》是依託武漢大學，由徐細明擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：放射治療誘導肝癌細胞上皮-間質轉化及分子機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：徐細明
- 依託單位：武漢大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
肝癌是我國常見的惡性腫瘤。放射治療在肝癌治療中占有重要的地位。其在治療過程中，可促進殘存癌細胞的侵襲和轉移，但機制尚未明確。上皮-間質轉化（Epithelial.-Mesenchymal Transition, EMT）是腫瘤轉移的關鍵事件，尤其是肝癌的轉移與EMT密切相關。課題組從放療後行肝癌切除的癌組織中觀察到肝癌細胞的EMT；同時，用一定劑量射線處理肝癌細胞株後，也可誘導肝癌細胞梭形變（EMT的形態學變化）。由此推測放射治療可以誘導肝癌細胞發生EMT，促進肝癌的侵襲和轉移。本課題從細胞及動物實驗水平，檢測肝癌細胞經放射處理後的形態學變化、EMT的分子標記、功能檢測（侵襲和遷移）、調控蛋白、信號通路的表達及相應通路抑制劑預處理後放療對肝癌細胞EMT的影響，來闡明放療誘導肝癌細胞EMT的作用及分子機制，以期通過抑制EMT來減小放療引起的腫瘤轉移風險，為增強放療療效提供理論及實踐依據。
結題摘要
肝癌是我國常見的惡性腫瘤，放射治療在肝癌治療中占有重要的地位，其在治療過程中，可促進殘存癌細胞的侵襲和轉移，但機制尚未明確。上皮-間質轉化是腫瘤轉移的關鍵事件，尤其是肝癌的轉移與EMT密切相關。課題組從放療後行肝癌切除術之中觀察到肝癌細胞的EMT，且EMT相關蛋白E-cadherin及vimentin在放療後呈梭形樣變的細胞株中表達顯著下降。上皮細胞標誌物E-cadherin在乏氧狀態下與正常含氧量的環境相比表達明顯下調。但經過熱療預處理後此表達變化明顯減弱。vimentin表達與之相反。乏氧狀態下，細胞侵襲性明顯加強，而熱療可顯著抑制細胞的侵襲。而單純給予熱療組細胞侵襲性明顯低於對照組。課題組實驗證明大鼠肝癌組織以及肝癌細胞株HepG-2、Bel-7402中5-LOX蛋白高表達，RT-PCR檢測肝癌組織以及肝癌細胞株5-LOX mRNA的表達陽性。其陽性表達率與正常組織相比，具顯著性差異。分別給予5-LOX特異性抑制劑齊留通（zileuton），動物肝癌發生率及癌結節數明顯減少，肝細胞異型性亦減少。細胞存活率呈劑量依賴性下降，細胞凋亡率呈劑量依賴性升高。大鼠肝癌組織以及肝癌細胞株HepG-2、SMMC772中1 2-LOX蛋白高表達於肝癌細胞漿，給予12-LOX特異性抑制劑黃芩黃素（baicalein）後，表達明顯下降。細胞存活率呈劑量依賴性下降，流式細胞術檢測可見細胞凋亡率呈劑量依賴性升高。抗凋亡蛋白Bcl-2表達呈劑量依賴性下降，促凋亡蛋白Bax呈劑量依賴性上升，磷酸化ERK1/2呈劑量依賴性下降。1 2-LOX的代謝產物1 2-HETE可以逆轉黃芩黃素的影響。
