《新型納米載體介導靶向BTBD7基因治療肝癌的實驗研究》是依託中南大學，由陶一明擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：新型納米載體介導靶向BTBD7基因治療肝癌的實驗研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陶一明
- 依託單位：中南大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腫瘤血管新生在肝細胞癌（HCC）發生和轉移復發過程中極為重要。我們前期工作發現BTB/POZ結構域蛋白7（BTBD7）調控肝癌細胞發生上皮間質轉化；並激活下游RhoC-ROCK2-FAK通路信號，導致肝癌細胞分泌較多的基質金屬蛋白酶2/9(MMP-2/9)和血管內皮細胞生長因子（VEGF）。強烈提示，BTBD7表達具有調控HCC血管新生形成促進轉移復發的重要功能，BTBD7是肝癌治療潛在的重要干預靶點，顯示出較好的套用前景。本課題擬構建以BTBD7基因為靶向的RNA干擾質粒與甲胎蛋白（AFP）啟動元件調控融合自殺基因yCDglyTK相結合的治療體系，並以轉染效率高且無毒副作用的磷酸鈣納米顆粒為基因運載系統，將該基因治療體系靶嚮導入肝癌細胞中，達到增強基因治療靶向性及安全性的目的。通過研究該體系體外殺傷肝癌細胞和體內靶向抑瘤作用機理，研究結果將為臨床肝癌的分子靶向治療提供新思路和理論依據。
結題摘要
腫瘤微環境和血管新生在肝細胞癌（HCC）發生和轉移復發過程中極為重要。對於肝癌轉移復發機制的闡明將是臨床有效防治復發轉移的前提和關鍵。本項目根據肝癌新生血管和上皮間質轉化的病理機理特點，圍繞調控肝癌新生血管關鍵基因BTBD7促進上皮間質轉化、激活下游RhoC-ROCK2-FAK通路信號、促使肝癌細胞分泌較多的MMP-2/9等問題，開展以下研究：①構建AFP增強子/啟動子驅動融合自殺基因靶向BTBD7siRNA表達基因治療體系，通過選擇磷酸鈣納米顆粒作為基因運輸載體將該基因治療體系導入肝癌細胞；②考察該基因治療體系殺傷肝癌細胞、抑制瘤內新生血管生成的作用及抗血管藥物治療的旁觀者效應；③考察靶向BTBD7siRNA表達基因治療體系治療肝癌的作用及機理。分析發現採用的磷酸鈣納米粒由於未經聚乙二醇（PEG）修飾，體內易消除，siRNA 基因沉默的療效會受到影響。通過Tween80 和PEG 6000最佳化，提高了BTBD7siRNA基因治療體系複合物抑瘤效果。並獲得新的重要研究發現，HCC細胞中的BTBD7表達上調激活CNPY2，通過磷酸化FAK/src-p130case複合物，促進HCC細胞Snail和纖連蛋白的活化，MMP-9的產生，從而增強HCC的侵襲轉移能力。研究成果不但加深對腫瘤血管生成機理、腫瘤EMT機制以及肝癌轉移復發分子機制的理解，而且為肝癌治療拓展新的思路和理論依據。
