《急性髓細胞白血病細胞耐藥新分子網路調控機制的研究》是依託蘇州大學，由胡紹燕擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：急性髓細胞白血病細胞耐藥新分子網路調控機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：胡紹燕
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
細胞耐藥是急性髓細胞白血病（AML）治療面臨的難題，已證明Mcl-1是AML耐藥機制中的關鍵。前期研究發現：1.耐藥細胞與非耐藥細胞晶片篩選發現多個差異基因；2.IPA軟體預測S100A9、S100A8和CCL2構成相互調控的分子網路，調控PI3K/Akt信號通路；3.實驗證實耐藥株中Akt信號途徑活化，S100A8、S100A9、CCL2表達變化的驗證符合晶片結果，Mcl-1升高，提示該分子網路在AML耐藥機制中可能發揮重要作用。有關該分子網路目前無報導。本研究擬1.網路分子表達與臨床耐藥的相關分析；2.表達載體使基因過度表達或下調，證實Akt調控Mcl-1參與AML耐藥；3.多組合的基因表達實驗系統論證分子網路的存在、調控，以及與Akt、Mcl-1和AML耐藥的關係。該網路通路一經證實存在並參與AML耐藥的發生，不但有助於預測AML耐藥，而且將為AML的治療提供新思路、新策略和新靶標。
結題摘要
細胞耐藥是急性白血病復發的主要因素之一。先前利用HL-60耐ABT-737細胞株模型，通過IPA軟體發現S100A8/S100A9/CCL2基因存在一個耐藥相關的網路。為此我們對3個基因的功能進行了研究。我們利用HL-60耐藥細胞株分別轉染了3個基因和基因共轉染，並通過藥物篩選和基因鑑定實驗證實目的基因成功轉染到細胞株中，分別進行了細胞增殖、分化、凋亡、遷移和侵襲以及耐藥的研究。我們的結果顯發現S100A9具有非常明顯的抗藥性，對AML化療中的常見化療藥物：柔紅黴素、足葉乙甙和阿糖胞苷都有明顯抗藥性，但對高三尖杉酯鹼沒有抗藥性。為了研究耐藥機制，我們做了RNA-SEQ，目前數據還在分析中。Western Blot的檢測結果顯示S100A9的耐藥性是通過干擾了線粒體的凋亡途徑實現的。S100A8基因的功能研究也顯示了相似的結果，但對足葉乙甙的抗藥性更明顯，且表現為遲發性耐藥。Western Blot的檢測結果顯示S100A8的耐藥性是通過干擾了線粒體的凋亡途徑實現的。而共轉染S100A8/A9的細胞株則沒有顯示出更強烈的抗藥性。CCL2的功能研究顯示CCL2參與細胞的增殖過程，細胞下調CCL2的表達使細胞的增殖過程減慢，而CCND1參與了這一調控過程。同時CCL2參與了細胞的遷移過程，並受C3AR1的調控。C3AR1的功能試驗顯示C3AR1具有促進細胞增殖、侵襲和細胞耐藥的功能，耐藥性表現為拓撲異構酶II類抑制劑的特異性耐藥。分子機制的研究發現其抗藥性也是通過影響了線粒體的途徑實現的，而SOCS2，BIRC7和LCK介導了線粒體的凋亡過程。臨床標本的檢測發現高表達S100A9、S100A8和C3AR1的病人，生存期縮短；siRNA196b、siRNA155和siRNA25與兒童AML的預後相關。本課題的創新性在於：1、細胞因子參與了急性髓細胞白血病的耐藥，且表現為因子特異性介導的藥物特異性耐藥；2、線粒體凋亡通路是細胞因子介導耐藥的主要途徑；3、急性髓細胞白血病調控線粒體凋亡通路有新的機制；4、發現了兒童特異性的AML預後意義的miRNA。
