《白血病幹細胞歸巢耐藥的機制研究及逆轉》是依託華中科技大學，由孟力擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：白血病幹細胞歸巢耐藥的機制研究及逆轉
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：孟力
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
難治性和復發患者的治療正成為血液系統惡性腫瘤治療的重點和難點。多藥耐藥的發生是白血病患者復發和難治的重要原因。本項目捕捉白血病幹細胞致化療耐藥的可能關鍵點，分別建立歸巢耐藥模型和骨髓微環境耐藥模型，探討血液腫瘤中AKT2對白血病幹細胞所致化療耐藥的促進作用；從基因和蛋白兩個層面研究AKT2存活通路對JNK/P38凋亡通路的抑制作用；採用免疫共沉澱結合蛋白質組學及生物信息學方法分析、確定兩條通路之間平衡與失衡的關鍵的調節點，以篩查到的效應基因為靶點，運用本實驗室RNAi文庫平台在多基因水平對腫瘤耐藥的機制進行探討，深入研究白血病幹細胞化療耐藥的分子機制；並與本實驗室構建的新型選擇複製性腺病毒結合，發揮RNAi文庫的高通量封閉和腺病毒載體的選擇性複製的雙重優勢，以實現血液腫瘤耐藥的靶向逆轉, 探索體內套用的可行方案。
結題摘要
本項目擬以TNFα和EET為切入點，從整體、細胞、分子等三個水平以及多基因水平全面闡述慢性粒細胞白血病中，白血病幹細胞和微環境介導的TKI耐藥機制，為慢性粒細胞白血病的治療提供新的方向，解決難治復發的難題。復發難治的主要原因就在於白血病幹細胞的存在，因此我們針對白血病幹細胞進行了一系列實驗並取得一定成果，從基因水平闡述了白血病幹細胞致耐藥的分子機制。我們成功建立TNFα基因缺失的K562細胞株，並在mRNA水平和蛋白水平上驗證了基因缺失後表達下降的效應，且這種處理不會影響K562細胞中具有關鍵功能的BCR/ABL融合基因。在體外和體內試驗中，我們發現TNFα基因缺失會致使K562細胞凋亡增加，增殖減慢，集落形成和裸鼠成瘤能力受損。這種效應可能是由於TNFα的缺失使STAT5及其相關的miRNA表達的改變造成的。我們的工作初步揭示了TNFα的基因靶向對於K562細胞的效應，有望為慢性髓系白血病的治療提供一個新的思路。另外，本項目基礎研究證實環氧二十碳三烯酸（EET，epoxyeicosatrienoicacid）在白血病幹細胞的脂質代謝中有重要作用，本研究成功分選出CD34+白血病幹細胞，體外實驗驗證EET對白血病幹細胞的增殖、凋亡和克隆形成試驗，證實了EET對CD34+白血病幹細胞的克隆形成有影響，EET可能促進白血病幹細胞進入增殖分化狀態，從而使TKI發揮作用，成為聯合TKI治療慢性粒細胞白血病，減少慢性粒細胞白血病的耐藥問題，具有臨床意義。目前的研究成果為慢性粒細胞白血病的聯合治療提供一定基礎，具有深遠意義。
