《Spi2A抑制自噬解除MLL-AF9白血病幹細胞化療耐藥與機制研究》是依託華中科技大學，由李蕾擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：Spi2A抑制自噬解除MLL-AF9白血病幹細胞化療耐藥與機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：李蕾
- 依託單位：華中科技大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
白血病耐藥和復發仍然是目前白血病治療成功的瓶頸。研究表明①白血病幹細胞（LSCs）的存在是急性髓系白血病（AML）耐藥和復發的根本原因，②自噬增強是LSCs產生耐藥的機制之一。我們的前期研究發現造血幹細胞中高表達的Spi2A能抑制溶酶體功能和自噬，從而抑制溶酶體功能過強導致的自噬性凋亡。基於MLL-AF9陽性AML小鼠 LSCs中Spi2A顯著低表達，結合我們的初步發現MLL-AF9 LSCs存在高水平自噬和低水平凋亡，推測低水平Spi2A極有可能引起自噬異常激活導致MLL-AF9 LSCs耐藥。為此本項目擬證實增強MLL-AF9 LSCs中Spi2A表達能否抑制自噬，促進凋亡和衰老，並緩解MLL-AF9 LSCs耐藥，為尋找根治AML的新策略提供線索。
結題摘要
本研究按計畫構建出MLL-AF9-AML小鼠模型，但構建小鼠Serpina3g表達慢病毒載體後其Spi2A蛋白表達量低，後續蛋白功能實驗實施困難，故選擇前期研究急性髓系白血病（AML）病人骨髓CD34+CD38-細胞（白血病幹細胞，LSCs）中低水平的miR-34c-5p為研究對象，探討miR-34c-5p在LSCs化療耐藥機制中的作用。研究中，我們證實體外上調 miR-34c-5p 表達水平可誘導 AML CD34+CD38-細胞衰老，同時，過表達 miR-34c-5p的KG-1a 細胞構建的小鼠白血病模型中白血病細胞負荷明顯減少，有效抑制白血病的發生髮展並促進 AML乾祖細胞的清除。進而，我們繼續研究 miR-34c-5p在AML LSCs中低表達進而使其抵抗衰老的分子機制，發現miR-34c-5p可以通過P53-P21cip1-CDKs/Cyclins或P53非依賴CDKs/Cyclins途徑誘導AML CD34+CD38-細胞衰老，囊泡外排是AML LSCs內miR-34c-5p表達降低的重要機制之一，miR-34c-5p可通過靶向下調RAB27B抑制外泌體外排，進一步促進細胞內miR-34c-5p表達上調，形成miR-34c-5p/RAB27B/Exo-shedding正反饋調控。總之，本研究證明了AML LSCs通過RAB27B增加miR-34c-5p外排進而抵抗衰老是LSCs化療耐藥的機制之一，為進一步研究白血病化療耐藥機制打下了基礎。本項目已經培養1名博士研究生和1名碩士研究生。本研究有2篇SCI論文在投。
