《TNFAIP8在急性髓性白血病耐藥中的作用及機制研究》是依託山東大學，由盧菲擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TNFAIP8在急性髓性白血病耐藥中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：盧菲
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
多藥耐藥（MDR）是急性髓性白血病(AML)難治/復發的重要原因，也是制約AML治療的瓶頸。因此探尋MDR的調控機制，尋找有效靶點是目前難治與復發AML治療的關鍵點。新近研究發現TNFAIP8對細胞凋亡具有負性調節作用，在腫瘤發生、發展及侵襲過程發揮重要作用。我們前期研究發現TNFAIP8與AML耐藥過程密切相關，然而其在AML耐藥中發揮作用的途徑及機制尚不清楚，有關TNFAIP8基因功能的報導仍處於起步階段。本課題擬在前期研究基礎上，研究TNFAIP8分子對AML生物學行為的影響；明確TNFAIP8對AML多藥耐藥的調控作用；闡明TNFAIP8作用結構基礎及作用模式；體內探討靶向TNFAIP8增強AML化療藥物敏感性的可行性。此系統性、原創性研究將提出AML耐藥新機制，為難治/復發AML的早期預警和檢測提供新的生物標記物，對於提高難治/復發AML診療水平具有重要的臨床意義。
結題摘要
多藥耐藥（MDR）是急性髓系白血病(AML)難治/復發的重要原因，探尋MDR的調控機制，尋找有效靶點是目前難治與復發AML治療的關鍵點。TNFAIP8對細胞凋亡具有負性調節作用，前期研究發現TNFAIP8與AML耐藥過程密切相關，本課題對TNFAIP8在AML多藥耐藥中的作用及具體機制進行深入研究。研究結果證實AML患者骨髓CD34+細胞中存在TNFAIP8高表達，TNFAIP8在復發/難治AML患者中表達顯著高於初診患者，主要表達TNFAIP8亞型2，TNFAIP8在AML耐藥細胞株中表達水平顯著高于敏感細胞株；下調TNFAIP8表達可明顯降低AML耐藥細胞株增殖能力，增加細胞對化療藥物的敏感性和化療藥物誘導的細胞凋亡，細胞周期被阻滯在G1/S期；TNFAIP8表達上調後AML細胞株增殖能力明顯增強，明顯降低了AML細胞對多種化療藥物的敏感性，化療藥物誘導的AML細胞凋亡明顯減少，通過G1/S轉換點的細胞增多；利用轉錄組學研究TNFAIP8的生物學功能和下游信號通路，測序鑑定出AML耐藥細胞株TNFAIP8下調後1494個差異表達基因，Pathway分析顯示差異基因主要富集於MAPK通路、Hippo通路、PI3K-Akt通路、凋亡相關通路等，Western blot法證實凋亡通路中Caspase3和Caspase8等凋亡因子活化隨TNFAIP8減少而增加，說明TNFAIP8可能通過抑制Casepase3和Casepase8活化來減少AML細胞凋亡，增強AML細胞對化療藥物的耐藥性；利用Chipbase資料庫預測結果顯示，在TNFAIP8啟動子區域存在轉錄因子ELF1的結合位點，提示ELF1可能調控TNFAIP8表達。研究結果證實，過表達K562中ELF1能明顯上調TNFAIP8表達，ChIP-qPCR結果顯示，ELF1分子可與TNFAIP8啟動子區域-1154~ -1142和-1954~-1942 結合。體內實驗證實上調TNFAIP8表達可增強小鼠AML細胞在小鼠體內的定植能力。本研究通過體內、外實驗探討靶向 TNFAIP8 對 AML耐藥的影響，為難治/復發 AML 的早期預警提供新的生物學標記物，為最佳化和開發基於 TNFAIP8 作用靶點的小分子藥物，提高難治/復發白血病治療水平提供了豐富的實驗證據。
