《內皮細胞PHACTR1在動脈粥樣硬化中的作用及機制研究》是依託同濟大學，由龐錦江擔任項目負責人的重大研究計畫。
基本介紹
- 中文名：內皮細胞PHACTR1在動脈粥樣硬化中的作用及機制研究
- 項目類別：重大研究計畫
- 項目負責人：龐錦江
- 依託單位：同濟大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
冠狀動脈疾病是導致病人死亡的主因之一。GWAS研究發現，PHACTR1與冠狀動脈疾病顯著相關。但其在動脈粥樣硬化中的作用尚無報導。本課題組建立了PHACTR1全身和條件敲除小鼠。前期結果發現，全身敲除小鼠發育正常，但活體顯微實驗顯示敲除小鼠腸系膜動脈單核細胞粘附明顯減弱。離體條件下， 敲減PHACTR1明顯抑制TNF-α誘導的內皮細胞激活和NF-κB信號通路。 因此，提出假設PHACTR1通過激活NF-κB信號通路，促進內皮細胞活化和單核細胞粘附，從而導致動脈粥樣硬化的發生和發展。為驗證該假設，我們首先研究PHACTR1對內皮細胞激活的作用和機制。然後，用PHACTR1內皮特異性敲除ApoE-/-小鼠來研究PHACTR1對動脈粥樣硬化的作用。最後，我們用全身PHACTR1敲除 ApoE-/-小鼠來進一步驗證PHACTR1對動脈粥樣硬化的影響。這一研究將為冠心病治療提供新機制、新靶標。
結題摘要
冠狀動脈疾病是導致病人死亡的主因之一，但其分子機制尚未明確。GWAS研究發現，PHACTR1多個SNP均與冠脈疾病顯著相關。前期生物信息學分析表明，這些SNP與PHACTR1基因表達同樣關係密切。但PHACTR1在冠脈疾病中的作用尚不明確，特別是尚無相關在體研究發表。故本課題組建立了PHACTR1全身敲除小鼠。該小鼠發育正常，但PHACTR1敲除後明顯抑制高脂飲食誘導的Apoe-/-小鼠動脈粥樣硬化及斑塊內炎症細胞浸潤。分析PHACTR1表達譜發現，其高表達於小鼠血管內皮細胞。進一步對野生型及敲除小鼠主動脈內皮細胞進行RNAseq分析表明，PHACTR1與基因轉錄調控密切相關，並且主要影響PPARγ/RXRα轉錄因子。內皮細胞PPARγ可抑制內皮細胞炎症反應。生化實驗表明PHACTR1能夠結合PPARγ並抑制其轉錄因子活性。免疫螢光染色顯示，PHACTR1在高剪下力層流情況下定位於細胞質，而在低剪下力湍流刺激下定位於細胞核，從而調控PPARγ通路。因此，本項目揭示了PHACTR1作為新的機械力敏感的轉錄調控因子在動脈粥樣硬化中的作用，其在低剪下力情況下發生核轉位，結合併抑制PPARγ活性，從而促進內皮細胞炎症反應。本研究對血管內皮功能調控機制研究具重要意義，並將為動脈粥樣硬化等疾病的治療藥物研發提供新方向。
