《JAML在動脈粥樣硬化發生髮展中作用機制的研究》是依託山東大學，由楊建民擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：JAML在動脈粥樣硬化發生髮展中作用機制的研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：楊建民
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
單核細胞的內皮下浸潤和泡沫細胞形成是動脈粥樣硬化（AS）形成的始動環節，連線粘附分子蛋白（JAML）因在單核細胞跨內皮轉移的重要作用近年來備受研究者關注，但JAML在AS發生髮展中的作用和分子機制知之甚少。為探明JAML在AS發生和發展過程中的作用，本課題採用首先在體外實驗研究JAML對單核細胞趨化、巨噬細胞泡沫化和炎症反應的作用機制，篩選關鍵信號分子；然後在高脂餵養的ApoE敲基因小鼠，在斑塊形成的不同階段通過過表達和干擾慢病毒載體，從正反兩個方面驗證假設。超聲動態觀察各組斑塊進展，病理學檢查斑塊脂核大小、纖維帽厚度；雷射共聚焦、免疫組化、實時定量RT-PCR、Western blot等技術對JAML及炎性指標和關鍵信號分子進行定性定量分析，同時檢測血清學各項指標，以了解斑塊中JAML的作用機制以及干預前後斑塊變化並分析這些變化是否與JAML干預有關。
結題摘要
炎症反應是動脈粥樣硬化的內在因素之一。近年的研究發現新型連結粘附分子樣蛋白(junction adhesion molecule-like protein, JAML) 在單核細胞粘附和遷移過程中發揮著至關重要的作用。動脈粥樣硬化的發病機制複雜，JAML在動脈粥樣硬化疾病中是否發揮作用國內外尚未見相關報導。本課題套用APOE-/-敲基因小鼠及體外培養的單核/巨噬細胞，探索了JAML在動脈粥樣硬化中的作用及其調控機制。結果表明，JAML在高脂餵養的APOE-/-小鼠主動脈中表達明顯高於C57BL/6小鼠。因此我們我們構建了JAML shRNA慢病毒表達載體，進一步研究了JAML基因敲除對於動脈粥樣硬化形成和斑塊穩定性的影響。結果發現，在早期動脈粥樣硬化模型中，JAML基因敲除顯著減少主動脈表面斑塊面積，提示JAML在動脈粥樣硬化形成中發揮重要作用；在晚期斑塊模型中，JAML基因敲除顯著減少巨噬細胞和脂質含量，增加膠原和平滑肌細胞含量，提示JAML對於動脈粥樣硬化斑塊穩定性發揮著重要作用。最後我們通過體外實驗對JAML調控動脈粥樣硬化的機制進行了探討。結果發現oxLDL促進巨噬細胞JAML及表達，進一步的研究發現oxLDL影響巨噬細胞脂質轉運相關蛋白SR-A、ABCA1、ABCG1的表達，然後我們進一步證實了ABCA1在JAML介導的動脈粥樣硬化中的作用。本課題首次揭示JAML在動脈粥樣硬化中的生物學作用及分子機制，並為疾病的防治篩選新的靶點，具有重要的理論意義和潛在的臨床套用價值。
