《PTRF在動脈粥樣硬化易損斑塊中的作用及機制研究》是依託中山大學，由談智擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：PTRF在動脈粥樣硬化易損斑塊中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：談智
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
易損斑塊破裂是導致臨床急性心血管事件的關鍵。VSMC脂質沉積對易損斑塊內脂質核形成具有重要作用，其對易損斑塊的影響及機制還不清楚。我們預實驗表明，聚合酶Ⅰ轉錄釋放因子(PTRF)基因敲除的VSMC，能對抗高糖高脂誘導的脂質沉積和表型轉化，提示PTRF介導脂質沉積對VSMC表型轉化有影響。進一步發現，PTRF蛋白通過泛素途徑降解，在AS斑塊內表達增加。已知PTRF參與膠原調控，因此推測PTRF對易損斑塊有影響。本項目擬：從降解途徑影響相關蛋白降解與定位來闡明PTRF介導脂質沉積的分子機制；明確c-Src、PI3K、RhoA/ROCK-2信號通路在PTRF影響表型轉化中的作用。從脂質沉積導致生物學功能改變入手，研究其影響AS易損斑塊的分子機制；在AS模型和臨床標本上證實PTRF對AS易損斑塊形成及穩定具有影響。本研究可加深對AS易損斑塊形成的了解，也可為臨床逆轉或穩定易損斑塊提供新的分子靶點。
結題摘要
動脈粥樣硬化（AS）是心血管疾病的病理基礎。血管平滑肌細胞（VSMC）是動脈粥樣硬化（AS）斑塊內唯一能夠合成膠原的細胞，其功能改變在 AS 斑塊演變過程中起著重要作用。聚合酶Ⅰ轉錄釋放因子（PTRF/Cavin-1）是一種新發現的細胞質膜小凹結構蛋白，具有多種生物學功能。 我們首先在血管內膜增殖模型上證實了Cavin-1表達下降，同時伴隨著蛋白酶降解途徑增強。進一步使用shRNA抑制Cavin-1的表達可以促進血管內膜增生。Cavin-1對VSMC的作用與CAV-1有關，通過分別影響ERK的磷酸化和MMP-9的活性來促進VSMC的增殖和遷移，其中Cavin-1對VSMC遷移的作用強於促增殖作用，下調Cavin-1的表達，可以通過促進溶酶體降解途徑來促進CAV-1的降解。這些結果首次證明Cavin-1是一個有效的防治AS形成的靶點。 接著我們發現，棕櫚酸處理可以增加VSMC細胞內脂質沉積。下調Cavin-1的表達，可以抑制棕櫚酸對脂質沉積的影響。進一步發現，下調VSMC上Cavin-1的表達，清道夫受體CD36和膽固醇調節元件結合蛋白(SREBP-2)的表達並無明顯變化，而腺苷三磷酸結合轉運蛋白G -1(ABCG-1)表達下降。說明Cavin-1對脂肪的攝入和合成影響不大，但可通過促進脂肪的轉出，從而調節VSMC細胞內的脂質沉積，這對易損斑塊的演變具有重要作用。 什麼是Cavin-1介導導致易損斑塊形成的直接原因？我們認為與膠原的代謝有關。在培養的VSMC上，下降Cavin-1的表達，能進一步促進膠原合成，說明Cavin-1能夠影響膠原的合成。同時通過明膠酶譜實驗，發現下降VSMC Cavin-1的表達，能夠明顯增加MMP-9的活性。通過以上實驗證實Cavin-1可以通過影響膠原代謝對易損斑塊的形成具有重要作用。進一步，我們在ApoE缺陷小鼠上，通過高脂加上血管損傷誘導易損斑塊模型，發現隨著易損斑塊的形成，血管壁上Cavin-1 的表達下降。這個在動物模型上證實了，VSMC上Cavin-1的表達改變是導致易損傷斑塊形成的一個關鍵因素。 綜上所述，我們證實了Cavin-1在易損斑塊中的作用。但是什麼因素參與調節Cavin-1表達變化還不清楚。我們進一步研究發現，miRNA29a可以調控Cavin-1的表達。本研究可為臨床逆轉或穩定易損斑塊提供新的分子靶點。
