《NonO在動脈粥樣硬化斑塊易損性中的作用及機制研究》是依託山東大學，由張凱擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：NonO在動脈粥樣硬化斑塊易損性中的作用及機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張凱
- 依託單位：山東大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
為了明確NonO在動脈粥樣硬化(AS)斑塊易損性中的作用及其分子機制，本課題首先在ApoE敲基因小鼠中通過頸動脈套管+高脂餵養的方法構建易損斑塊模型，轉染NonO過表達和干擾的慢病毒載體，再行精神應激4周，從正反兩方面觀察NonO對斑塊破裂率及易損指數的影響，並通過雷射共聚焦、免疫組化、實時定量RT-PCR、Western blot等技術檢測頸動脈斑塊內膠原含量、炎症反應、細胞凋亡及氧化應激水平。體外實驗部分血管平滑肌細胞或巨噬細胞轉染NonO過表達和干擾的慢病毒載體後給予TNF-α刺激，觀察NonO對膠原合成和降解、炎症反應、細胞凋亡、氧化應激以及相關信號通路的影響，明確NonO對細胞的作用及其機制，從而為穩定AS斑塊提供新的干預靶點。
結題摘要
NonO 是一個大小為 54KDa 並在體內廣泛表達的蛋白，NonO可直接與 DNA 結合參與轉錄調控，也可與其他轉錄蛋白相互作用調節基因表達。既往研究提示 NonO 可能參與調節膠原代謝和炎症反應，但是NonO在動脈粥樣硬化斑塊穩定性中的作用尚未明確。我們預實驗發現ApoE-/-小鼠易損斑塊模型中，頸動脈斑塊內NonO的表達與Control組正常小鼠的頸動脈組織相比顯著升高，強烈提示NonO在AS易損斑塊的形成中發揮作用。因此，我們提出如下假說： NonO 通過促進炎症反應，抑制膠原合成進而增加 AS 斑塊的易損性。為了驗證這一假說，我們設計了一系列的體內體外實驗。在體內實驗中，我們通過頸動脈套管，高脂飲食和精神應激的方法誘導不穩定斑塊的形成，然後通過在頸動脈斑塊局部過表達和基因沉默 NonO 觀察 NonO 對易損斑塊破裂率的影響以及斑塊內成分的改變；在體外實驗中，通過過表達和基因沉默 NonO 探討 NonO 作用的分子機制。我們首次發現 NonO 在動脈粥樣硬化斑塊中高表達；在 ApoE-/-小鼠易損斑塊模型中， NonO 降低斑塊穩定性，增加斑塊的破裂率，而 NonO 基因沉默後斑塊穩定性增強，破裂率降低；NonO 降低斑塊穩定性的機制為增加 MMP-2 和 MMP-9 的生成，減少P4Hα1 的表達以及抑制 NF-κB 介導的局部炎症反應。這一發現為干預動脈粥樣硬化進展提供了新的治療靶點。
