《TLR4 /ROS信號通路在AMD發病中的作用機制研究》是依託上海交通大學，由尹莉莉擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TLR4 /ROS信號通路在AMD發病中的作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：尹莉莉
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
最近，本課題組發現循環血液中低密度脂蛋白（LDL）增高能引起SD大鼠視網膜發生年齡相關性黃斑變性（AMD）樣改變，但作用機制尚不清楚。研究表明，脂質可通過TLR4受體引起的固有免疫介導的炎症通路介導細胞損傷，而免疫炎症反應與AMD發病密切相關。因此本研究擬在原創性研究的基礎上，分別在細胞和整體動物水平採用電鏡、免疫螢光、RT-PCR、western blot、RNA干擾、轉染等技術和方法：（1）觀察LDL及OX-LDL對TLR4-/-及WT小鼠視網膜功能及脈絡膜-Bruch-RPE複合體的影響；（2）探討RPE細胞中LDL及OX-LDL對TLR4的表達變化機制；（3）研究LDL及OX-LDL對RPE細胞中TLR4、Lyn蛋白表達、ROS生成和炎症細胞因子表達的影響。通過上述研究，闡明TLR4 /ROS信號通路在早期AMD發病中作用機制，為將來臨床早期預防和治療AMD提供新的靶點。
結題摘要
最近，本課題組發現循環血液中低密度脂蛋白（LDL）增高能引起SD 大鼠視網膜發生年齡相關性黃斑變性（AMD）樣改變，但作用機制尚不清楚。研究表明，脂質可通過TLR4 受體引起的固有免疫介導的炎症通路介導細胞損傷，而免疫炎症反應與AMD 發病密切相關。因此本課題在原創性研究的基礎上，給TLR4-/-和WT小鼠尾靜脈注射LDL，發現在WT小鼠中，ERG振幅明顯降低，光感受器細胞功能明顯受到影響，而TLR4-/-小鼠電生理未見明顯變化 。進一步通過病理切片，比較TLR4-/-和WT小鼠脈絡膜-Bruch-色素上皮複合體的整體改變，電鏡下測量Bruch膜厚度，觀察複合體的超微結構。發現在TLR4-/-中Bruch膜厚度與正常組相比無明顯差異，超微結構基本正常。體外予以LDL及OX-LDL環境下培養的RPE細胞，用流式細胞及TUNEL比較觀察RPE細胞凋亡情況，數據表明OX-LDL誘導RPE凋亡部分依賴於Erk-Bax/Bcl-2信號通路。課題組成員還發現OX-LDL 上調RPE 細胞中TLR4表達、ROS和炎症細胞因子IL-6分泌增多的影響。通過上述研究，闡明TLR4 /ROS 信號通路在早期AMD 發病中作用機制，為將來臨床早期預防和治療AMD 提供新的靶點。項目研究成果在 Current Eye Research雜誌上發表
