《FSTL1促糖尿病動脈粥樣硬化斑塊發生及機制研究》是依託上海交通大學，由楊克擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：FSTL1促糖尿病動脈粥樣硬化斑塊發生及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：楊克
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
糖尿病動脈粥樣硬化病變程度高，需明確其發病機制。現發現：糖尿病動脈粥樣硬化中FSTL1分泌升高，而斑塊中巨噬細胞主要表達該分子，其促進了巨噬細胞脂質累積、炎症及增殖。FSTL1受體為RAGE、TLR4、CD14及TLR2，RAGE調控其表達，而FSTL1促進TLR4-CD14-CD209形成複合物，並激動了TLR2/4下游信號通路。這提示了FSTL1通過多重調控作用促進巨噬細胞病理改變是糖尿病動脈粥樣硬化進展的重要機制。因此，本研究將探討：（1）RAGE與FSTL1相互關係（2）FSTL1與受體結合位點（3）FSTL1調控複合體形成及其對巨噬細胞脂質累積、炎症及增殖的影響（4）FSTL1對TLR2/4下游信號通路調控作用（5）在體研究FSTL1對糖尿病動脈粥樣硬化進展的影響。以期闡明FSTL1對糖尿病動脈粥樣硬化斑塊進展的調控機制，為在體干預治療糖尿病動脈粥樣硬化斑塊提供重要的科學依據和實驗基礎。
結題摘要
項目背景：糖尿病患者造成的冠狀動脈粥樣硬化病變支數多且呈嚴重瀰漫性病變。因此，針對糖尿病合併動脈粥樣硬化的機制研究是一個非常迫切的命題。糖尿病合併動脈粥樣硬化斑塊進展快涉及多種細胞及血清因子變化，我們前期研究發現糖尿病合併動脈粥樣硬化病人血清中FSTL1表達顯著性升高，而其與糖尿病合併動脈粥樣硬化病變的關係及機制不清，因此本研究從5個方面展開研究：（1）RAGE與FSTL1相互關係（2）FSTL1與受體結合位點（3）FSTL1調控複合體形成及其對巨噬細胞脂質累積、炎症及增殖的影響（4）FSTL1對TLR2/4下游信號通路調控作用（5）在體研究FSTL1對糖尿病動脈粥樣硬化進展的影響。主要研究內容：（1）利用細胞因子蛋白晶片技術檢測發現：相比正常組，糖尿病組人群中FSTL1表達升高2倍；而進一步擴大樣本數量，檢測發現糖尿病動脈粥樣硬化病人血清中FSTL1表達量最高，並且FSTL1含量顯著向高濃度偏移；相關性分析發現，FSTL1與CRP密切相關（R=0.467，P＜0.01）。（2）利用免疫組化檢測糖尿病合併動脈粥樣硬化患者下肢主動脈斑塊組織，結果發現FSTL1在斑塊組織中呈強陽性表達並與巨噬細胞表達定位一致；此外，糖尿病小鼠動脈粥樣硬化斑塊組織中也顯示斑塊脂質核心區巨噬細胞中FSTL1強表達，而非糖尿病小鼠動脈粥樣硬化斑塊組織中FSTL1弱陽性表達。（3）糖尿病動脈粥樣硬化病人中AGEs與FSTL1含量具有正相關性（R=0.148，P=0.021）；AGE-BSA刺激巨噬細胞後導致FSTL1表達和分泌均明顯增加，且呈劑量依賴性；而使用抗體封閉RAGE活性後，AGEs誘導FSTL1表達和分泌升高作用減弱。AGE-BSA促進巨噬細胞中FSTL1核轉錄因子AP-1及c-JUN表達升高。而在RAGE敲除或活性阻斷後， AGE-BSA所誘導的AP-1及c-JUN表達升高效應受到抑制。（4）FSTL1刺激下，TLR4、CD14和CD209三者結合，形成複合體，而利用siRNA敲低TLR4、CD14和CD209後，在FSTL1刺激後，巨噬細胞的脂質含量和膽固醇濃度都顯著減少，同時p38和TBK1磷酸化水平明顯受到抑制。（5）DC-SIGN與TLR4相互結合併激活下游非Myd88信號通路，促進NFκB活性增加。此外，TLR4與DC-SIGN的相互作用後，調控腎小管上皮細胞中炎症反應。（6）糖尿病合併冠心病
