《MiR-17-92在胃癌幹細胞自我更新中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由時永全擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：MiR-17-92在胃癌幹細胞自我更新中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：時永全
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
腫瘤幹細胞自我更新的調控機制尚未完全闡明。我們前期發現，miR-17-92基因簇在胃癌幹細胞分化過程中表達逐漸下降。文獻回顧顯示， c-Myc和shh能上調miR-17-92表達，PTEN、p21、p57 是miR-17-92的潛在靶基因，而上述5分子均與幹細胞自我更新有關。我們推測，c-Myc/Shh－miR-17-92－PTEN/p21/p57通路參與了胃癌幹細胞自我更新調控。本項目擬首先明確上述6分子在胃癌幹細胞分化過程中的表達變化規律。其次利用基因轉染分別調變上述6分子在胃癌細胞的表達，通過tumorsphere實驗、裸鼠體內成瘤、增殖、分化標誌檢測等闡明上述分子對胃癌幹細胞自我更新能力的調控作用，並藉助報告基因實驗明確其上下游關係。最後檢測上述6分子在胃癌組織的表達及其與患者臨床病理資料、預後的相關性。為明確miR-17-92對胃癌幹細胞自我更新的調控作用及機制提供理論依據。
結題摘要
本項目前期研究和文獻提示，c-Myc/Shh－miR-17-92－PTEN/p21/p57 通路可能參與了胃癌幹細胞自我更新調控。本項目研究目的是闡明miR-17-92在胃癌幹細胞自我更新中的作用及其分子機制。 本項目內容分為三部分。第一，驗證miR-17-92在胃癌幹細胞中的分化相關表達變化。通過CD44+EpCAM+流式分選或無血清低粘附培養基腫瘤細胞球分離兩種方式富集胃癌幹細胞，之後將其置於正常培養條件下誘導分化。RT-PCR檢測證實，miR-17、miR-19b、miR-20a、miR-92a表達水平呈逐漸下降趨勢，與胃癌幹細胞的分化密切相關；而miR-18a和miR-19a在胃癌幹細胞中呈低水平表達，與幹細胞分化無明顯相關性。第二，探討miR-17-92在胃癌細胞乾性維持中的作用。藉助基因轉染、表型檢測、靶分子預測、報告基因、挽救實驗等發現，miR-17-92可通過靶向E2F1和HIPK1促進胃癌幹細胞自我更新，miR-19a/b通過靶向MXD1促進胃癌細胞轉移，miR-19a/b通過靶向PTEN和MECP2促進胃癌細胞耐藥，miR-17通過靶向SOCS6促進胃癌細胞增殖，miR-92a通過靶向FOXD1促進胃上皮細胞腸化生。此外，本研究還發現，miR-129-5p通過靶向ABCB1、ABCC5和ABCG1調節胃癌細胞的化療藥物敏感性，miR-296-5p通過靶向抑制CDX1而促進胃癌細胞的增殖。第三，明確miR-17-92及其相關分子（p21、PTEN、p57、Myc）在胃癌患者中表達及其臨床意義。本項目發現，胃癌組織miR-19a和miR-92a表達水平可作為胃癌患者的獨立預後指標。胃癌患者外周血miR-17-92各個成員的表達水平均顯著高於健康對照者，其對胃癌的診斷效能優於傳統的胃癌標誌物CEA和CA19-9。胃癌組織p21和PTEN水平均與胃癌患者預後呈正相關，而p57和Myc與患者預後無明顯相關性，聯合檢測p57或PTEN和p21具有協同判定預後的價值。 課題組共發表直接相關SCI論著6篇、SCI特邀綜述2篇、中文論著2篇。培養博士研究生1名、碩士研究生3名。課題負責人2015年入選國家創新人才推進計畫中青年科技創新領軍人才，項目組吳瓊獲得2015年度陝西省優秀博士學位論文。
