《miR-17-92簇在慢性粒細胞白細胞發病中的作用及機制研究》是依託中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院，由李慶芳擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：miR-17-92簇在慢性粒細胞白細胞發病中的作用及機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：李慶芳
- 依託單位：中國人民解放軍軍事科學院軍事醫學研究院
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們前期研究發現miR-17-92在CMLCD34+細胞中高表達，並且與BCR-ABL 激酶活性、S1P1和SIRT1具有相關性，提示microRNA-17-92可能是參與CML發病的重要調控分子。本研究將比較CML乾祖細胞亞群中microRNA-17-92的表達差別；利用慢病毒介導的microRNA沉默策略，確定microRNA-17-92對CML細胞增殖、分化、凋亡及靜息等生物學特性的影響；確定高表達microRNA-17-92對正常造血幹細胞惡性轉化的作用；確定miR-17-92調節CML細胞生物學特性的靶基因，闡明其調控機制；建立bcr-abl基因轉移白細胞小鼠模型，闡明沉默microRNA-17-92對BCR-ABL誘導白血病發病的阻斷作用。該課題將闡明microRNA-17-92調控CML發病的作用與機制，為靶向CML幹細胞治療提供新的靶點。
結題摘要
miR-17-92 是與腫瘤發生髮展密切相關的miRNA簇，前期miRNA 表達譜顯示其在CML CD34+細胞中高表達。但是，miR-17-92 如何參與CML 發病並不清楚。本項目主要研究了miR-17-92在CML乾祖細胞中的表達及調控；高表達miR-17-92對正常造血幹細胞的轉化作用；利用miR-17-92敲除小鼠以及BCR-ABL誘導白血病發病模型，確定了miR-17-92對CML發病中的作用及機制。主要進展和發現包括：（1） 確定了miR-17-92在CML CD34+ 細胞上表達及調控。16例病人標本的結果分析確證CML患者骨髓CD34+ 細胞高表達miR-17-92。逆轉錄病毒介導bcr-abl基因表達提高造血細胞miR-17-92的水平。（2）觀察了miR-17-92高表達對正常造血細胞生物學特性的影響。慢病毒介導miR-17-92高表達促進臍帶血CD34+細胞增殖，抑制細胞凋亡，促進集落形成能力、抑制細胞向紅系分化的趨勢、增強細胞向粒系分化。（3）確定了miR-17-92對CML 細胞生物學特性的影響。miR-17-92可以促進K562細胞增殖，抑制其凋亡並調控細胞周期變化。利用細胞周期蛋白KSP的抑制劑SB743921也觀察到類似生物學效應，包括細胞周期阻滯、抑制增殖和誘導細胞凋亡。（4）利用miR-17-92基因敲除的小鼠模型評價了miR-17-92對正常造血細胞分化的影響。發現miR-17-92基因敲除對正常紅系和粒系分化影響不大。（5）利用上述模型，結合bcr-abl 誘導CML模型確定了miR-17-92基因簇在CML 發病中的作用。基因敲除miR-17-92延緩BCR-ABL誘導CML發病。（6）確定了TNFAIP3(A20) 是miR-17-92的新型靶基因。通過生物信息學分析及3’-UTR報告活性確定 A20 是miR-17-92的靶基因。並在CML標本中正證實了A20表達與bcr-abl活性相關，參與Imatinib抑制CML 細胞增殖的活性。（7）miR-17 介導低氧誘導骨髓MSC的血管生長因子分泌。上述研究進展系統闡明了miR-17-92基因簇在CML中的作用，為CML靶向治療提供了新的靶點。本課題培養研究生4名，在Leukemia & Lymphoma 等雜誌發表研究論文3篇，還有2篇SCI 論文待投稿。
