《microRNA-21對幹細胞樣肝癌細胞轉移特性的影響及作用機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由張寧擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA-21對幹細胞樣肝癌細胞轉移特性的影響及作用機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張寧
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
我們發現肝癌邊緣群(SP)細胞是一群具有幹細胞特性的種子細胞，它們較主群細胞具有能自我更新、致瘤能力強、耐藥特性突出、細胞周期靜止等特點，在肝癌發生中起關鍵作用。雖然體外實驗初步提示SP細胞還具備較強的轉移能力，但其作用和機制仍需深入研究。本研究擬明確肝癌SP細胞在轉移中的作用：通過體外侵襲、遷移實驗及動物體內轉移模型研究其轉移能力，利用基因晶片技術分析腫瘤轉移相關基因表達特點。鑒於我們還發現microRNA-21可能通過SP細胞調控肝癌轉移，本研究將利用實時PCR測定miR-21及其可能的標靶基因PTEN,MMPs,PDCD4在SP細胞中的表達水平，構建慢病毒載體上調或寡聚反義核酸及基因沉默技術下調上述基因，觀察miR-21對標靶基因表達的調控作用，並印證它們對SP細胞轉移能力的影響。從而闡明miR-21在調控肝癌SP細胞轉移中的部分作用機制，為研究新的肝癌轉移預防和治療策略奠定基礎
結題摘要
肝癌嚴重威脅人類健康，雖綜合療法手段多樣，但治療仍存在復發、轉移率高和耐藥性強的困局，這可能與幹細胞樣肝癌細胞密切相關。MiR-21與多種腫瘤的生物學特性密切相關，它可通過調控多個靶基因調控幹細胞樣腫瘤細胞的惡性表型。因此，我們對miR-21對幹細胞樣肝癌細胞轉移特性的作用及機制展開研究。前期我們證實肝癌SP細胞具有自我更新、多向分化、細胞周期靜止及高耐藥性等幹細胞特性。在本項目支持下，我們發現肝癌SP細胞具有較強的遷移/侵襲和趨化能力，可能在腫瘤轉移中作用關鍵。MiR-21在肝癌SP細胞中高表達，與腫瘤轉移相關的PTEN、RECK和PDCD4蛋白表達較低。調控miR-21水平時，肝癌SP細胞的轉移特性隨之改變，PTEN、RECK和PDCD4蛋白水平也隨miR-21的抑制而增加。雙螢光素酶報告基因實驗進一步證實PTEN、RECK和PDCD4確是受miR-21直接調控的靶基因。反向調控靶基因表達時，miR-21表達變化引起的轉移特性改變則有所回落。我們還發現SP細胞中STAT3、p-STAT3表達水平較高，STAT3抑制劑可致miR-21表達下降，其靶基因表達上調，並降低SP細胞趨化、侵襲和遷移能力。上述結果說明miR-21通過靶基因PTEN、PDCD4和RECK調控肝癌SP細胞的轉移特性，而STAT3可能作為上游因素調控miR-21。綜上，本項目研究了STAT3、miR-21及多個靶基因對肝癌SP細胞轉移侵襲能力的調控作用，為闡明肝癌惡性進展的調控機制奠定一定基礎，為進一步尋求肝癌的干預靶點和治療策略開拓思路。
