DNA裂解(DNA lysis)是2017年全國科學技術名詞審定委員會公布的老年醫學名詞。
基本介紹
- 中文名:DNA裂解
- 外文名:DNA lysis
- 所屬學科:老年醫學
- 公布時間:2017年
DNA裂解(DNA lysis)是2017年全國科學技術名詞審定委員會公布的老年醫學名詞。
DNA裂解(DNA lysis)是2017年全國科學技術名詞審定委員會公布的老年醫學名詞。定義DNA分子中連線核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂,DNA分解為寡核苷酸片段或游離核苷酸的過程。1出處《老年醫學名詞》第一版...
鹼裂解法通常有大量提取法和小量提取法,其提取原理是一樣的,只需體積按一定比例擴大。純化質粒DNA時通常還利用了質粒DNA相對較小及共價閉環兩個性質。開始進行克隆時,對於小量製備的質粒DNA,經過苯酚、氯仿抽提,RNA酶消化和乙醇沉澱...
該方法需要六步離心、五種試劑從全血中純化DNA。發明內容 技術方案 《提取純化DNA的試劑》提供試劑是由以下物質組成:預處理裂解液:pH為7.4-8.5,溶劑是水,溶質是如下終濃度的物質:10-100毫摩爾/升緩衝鹽,0.5-5克/100毫升的...
DNA提取主要是CTAB方法,其他的方法還有物理方式如玻璃珠法、超音波法、研磨法、凍融法。化學方式如異硫氰酸胍法、鹼裂解法。生物方式:酶法。根據核酸分離純化方式的不同有矽質材料、陰離子交換樹脂等。主要分類 真核生物DNA、細菌DNA、...
得到的基因組DNA可以進行PCR擴增及限制酶處理等。保存方式 室溫。低溫保存可能會有沉澱析出。如果發生析出現象,請於50℃溶解後,再於室溫保存。操作方法 全套操作約需1小時,分勻漿、細胞裂解、除蛋白、DNA純化等步驟,詳細說明如下。勻漿...
研究主鏈含硫硫鍵的聚醯胺胺新型聚陽離子與DNA在不同條件下分別組裝成可裂解聚陽離子/DNA納米粒子、可裂解聚陽離子/DNA多層膜和可裂解聚陽離子/DNA納米管。研究三種聚電解質複合物在體外和體內轉染,總結聚陽離子結構與轉染效率之間的...
註:RIPA裂解液的裂解產物中經常會出現一小團透明膠狀物,屬正常現象。該透明膠狀物為含有基因組 DNA等的複合物。在不檢測和基因組DNA結合特別緊密的蛋白的情況下,可以直接離心取上清用於後續實驗;如果需要檢測和基因組結合特別緊密的...
其中95%是雙鏈DNA有尾噬菌體;其他少數噬菌體的顆粒大小、蛋白外殼和生活周期等差別很大。大多數噬菌體導致宿主細胞裂解,絲狀噬菌體f1和M13等並不裂菌。噬菌體對其宿主的破壞作用很早就用於殺滅致病菌的研究。隨著細菌耐藥性的出現,對多...
如溫和λ噬菌體可在固定位點上整合入大腸桿菌染色體DNA成為其一部分,稱為前噬菌體,而宿主菌則呈溶源狀態但不影響其生存。一旦溶源菌中的前噬菌體被切離出來,就會生成大量噬菌體顆粒,導致宿主裂解。
3、 加200μl 細胞裂解液, 顛倒離心管數次,直到溶液變清亮。4、加200μl 中和液,顛倒離心管數次。5、4℃下12000g離心5分鐘,取上清液於新的eppendorf管中。6、加1ml Wizard少量 DNA 純化樹脂,顛倒離心管數次以充分混勻。7、取...
③DNA 簇與單鏈擴增產物的通用序列雜交,由於終止劑的作用,DNA 聚合酶每次循環只延伸一個 dNTP。每次延伸所產生的光信號被標準的微陣列光學檢測系統分析測序,下一次循環中把終止劑和螢光標記基團裂解掉,然後繼續延伸 dNTP,實現了邊...
臨床樣本核酸分離是指將採集的臨床樣本中的細胞裂解,並利用物理化學性質將核酸與其他物質進行分離。細胞中的核酸包括DNA和RNA,兩者均與蛋白質結合為核蛋白。臨床常見的檢驗樣本通常有全血、血清(漿)、腦脊液、組織、痰液、尿液及其他...
凋亡細胞的特徵性表現,包括DNA裂解為200bp左右的片段,染色質濃縮,細胞膜活化,細胞皺縮,最後形成由細胞膜包裹的凋亡小體,然後,這些凋亡小體被其他細胞所吞噬,這一過程大約經歷30-60分鐘,Caspase引起上述細胞凋亡相關變化的全過程尚...
在裂解過程中,細菌蛋白質、破裂的細胞壁和變性的染色體DNA會相互纏繞成大型複合物,後者被十二烷基硫酸鹽包蓋。當用K+取代Na+時,複合物會從溶液中有效地沉澱下來,離心除去變性劑後,就可以從上清中回收復性的質粒DNA。在SDS存在的...
酚抽提法、異丙醇沉澱法及甲醯胺裂解法是提取DNA最為經典的方法,很多方法的改進都是在這些方法的基礎上進行的,這三種方法均是利用蛋白酶K和十二烷基硫酸鈉(SDS)消化破碎細胞。在前兩種方法中,裂解液先用酚/氯仿去除蛋白質,再分別...
裂解後在鹼性溶液(1 m mol/L Na2EDTA,300 m mol/L NAOH p H13)中使DNA雙鏈打開,時間約為60分鐘。4 電泳 一般在低電壓(0.5~5V/cm)和短時間(20~30min)內進行。電壓過高或電泳時間過長,彗星細胞拖尾以致彗星消失,而...
使用方便:只需簡單地點樣和乾燥,純化DNA只需1小時 穩定性好:血樣品可在室溫下保存10年以上(穩定性實驗仍在進行中)。功能檢測:FTA卡保藏樣品與直接抽提樣品的PCR結果完全一致。安全可靠:裂解細胞並阻止細菌和真菌的生長。多種用途...
意義:發生在DNA特殊序列對之間,是噬菌體進入宿主細胞後整合到宿主DNA上的重組形式。機制 當噬菌體侵入大腸桿菌細胞後,λ噬菌體DNA有兩種存在型式:裂解狀態和溶源狀態。在裂解狀態下,噬菌體DNA在被感染的細菌中以獨立的環形分子結構...
DNA製備 參照薩姆布魯克等(1996) 的方法略加改進,取足肌約100 mg 切碎並溶於裂解液中,加入蛋白酶K 至終濃度為100μg/ ml,充分混勻後37 ℃消化4~5 h。加入RNase 至終濃度100μg/ ml,充分混勻後60 ℃作用30min。向樣品...
DNA拓撲異構酶是存在於細胞核內的一類酶,他們能夠催化DNA鏈的斷裂和結合,從而控制DNA的拓撲狀態,拓撲異構酶參與了超螺旋結構模板的調節。哺乳動物中主要存在兩種拓撲異構酶。DNA拓撲異構酶I通過形成短暫的單鏈裂解-結合循環,催化DNA複製...
λ噬菌體DNA的整合和切離是典型的位點專一重組。內容簡介 λ噬菌體感染大腸桿菌後,或是進入裂解生長,或是進入溶原生長。當噬菌體裂解宿主細胞的功能受到抑制,噬菌體DNA整合進宿主染色體並隨宿主染色體而進行複製,或作為一個獨立的郊猶...
DNA修飾裂解後,電泳觀察DNA片段長度即可知道突變是否存在。該技術較其他突變檢測系統有更多的優越性,可以掃描1~ 2 kb 的大片段DNA並在隨後的順序分析中定位突變位點,其效率可達100%。該手段通常首先對目標DNA和野生型DNA進行PCR 擴增,...
bDNA是由Chiron公司研發的分支鏈DNA信號放大技術,該技術克服了傳統的real time PCR技術中的缺陷與不確定因素,無需抽提純化RNA,無需反轉錄,無需PCR擴增,只要將樣本用特定裂解液裂解後,經探針雜交與信號放大後即可迅速得到基因定量結果...
技術回顧QuantiMAT技術的前身是分支鏈 DNA 信號放大技術 ,是一種不依賴PCR擴增的核酸雜交信號放大檢測技術。QuantiMAT是技術升級版,最佳化了第一代技術中心的缺陷和不足。該技術克服了傳統的real time PCR技術中的缺陷與不確定因素,無需...
此外,還配有一份試劑盒使用說明書,根據不同的生產商,可能還配有不同的試劑,如:DNA酶、溶菌酶等。操作步驟 1. 樣品處理 a. 植物組織:取新鮮或-70℃凍存100mg組織在液氮中研磨,把粉末加入到1ml裂解液中混勻。b. 動物組織...
基因交流就是基因重新的組合,同一物種,不同物種都可以。同一物種間主要通過有性生殖進行基因交流,但是不同種群間的個體,在自然條件下基因不能自由交流,此現象叫做隔離。基本原理 基因重組是由於不同DNA鏈的斷裂和連線而產生DNA片段的...
化學降解法,化學名詞。即 Maxam-Gilbert 化學降解法1977年,A.M.Maxam和W.Gilbert首先建立了DNA片段序列的測定方法,其原理為:將一個DNA片段的5'端磷酸基作放射性標記,再分別採用不同的化學方法修飾和裂解特定鹼基(表6-1),從而...
當5mC和C同時處於不同DNA分子上的同一位點時,該位點至少要有25%的5mC才能被N₂H₄法檢測到;MnO₄⁻法比N₂ H₄法更靈敏。因為這兩種基因組DNA化學修飾法均有抑制DNA聚合酶延伸的特性,無須進行DNA哌啶裂解就可通過基因...