Wizard少量DNA純化系統

Wizard少量 DNA 純化系統

Promega公司的Wizard少量DNA純化系統可快速有效的抽提質粒DNA,整個過程只需15分鐘。提取的質粒可直接用於DNA測序、酶切分析和體外轉錄等。

該系統中所含試劑和柱子可以用於50次1-3ml質粒培養液的分離和純化，試劑包括10ml細胞懸浮液，10ml細胞裂解液；10ml中和液，50ml Wizard少量DNA純化樹脂，50ml柱洗液（使用前加95%乙醇至120ml )和50支Wizard微型柱。

1、 1-3ml過夜培養細胞液4℃下 12000g離心1-2分鐘。

2、去除上清液，菌體細胞懸浮於200μl 細胞懸浮液中,充分混合,並移入eppendorf管中。

3、加200μl 細胞裂解液, 顛倒離心管數次,直到溶液變清亮。

4、加200μl 中和液,顛倒離心管數次。

5、4℃下12000g離心5分鐘，取上清液於新的eppendorf管中。

6、加1ml Wizard少量 DNA 純化樹脂,顛倒離心管數次以充分混勻。

7、取一次性注射器, 取出注塞,並使注射筒與Wizard微型柱連線,用移液槍將上述混合液加入注射筒中,並用注塞輕推,使混合物進入微型柱。

8、將注射器與微型柱分開,取出注塞, 再將注射筒與微型柱相連,加入2ml柱洗液,並用注塞輕推，使柱洗液進入微型柱。

9、取出微型柱置於eppendorf管中,離心2分鐘以除去微型柱中的柱洗液。

10、將微型柱放在一個新eppendorf管中，加50μl TE(或水)於微型柱中，靜止1分鐘後，4℃下12000g離心20秒。

11、丟棄微型柱，將eppendorf管中的質粒DNA貯於4℃或-20℃冰櫃。

[注意] 樹脂使用前應充分混勻,如有結晶,可將樹脂用25-37℃水浴處理10分鐘。

基本介紹