《DJ-1在胃癌多藥耐藥中的作用及其分子機制研究》是依託南昌大學，由朱正明擔任項目負責人的地區科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：DJ-1在胃癌多藥耐藥中的作用及其分子機制研究
- 項目類別：地區科學基金項目
- 項目負責人：朱正明
- 依託單位：南昌大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
多藥耐藥是胃癌化療失敗的主要原因，其分子機制仍未闡明。DJ-l蛋白是一種絲裂原依賴性癌基因產物。我們前期研究發現DJ-1在多藥耐藥胃癌細胞株中表達明顯高於其敏感親本胃癌細胞株，同時發現下調DJ-1表達能顯著提高多藥耐藥胃癌細胞對化療藥物的敏感性，提示DJ-1可能與胃癌多藥耐藥密切相關，但DJ-1是否直接參與胃癌多藥耐藥及其相應調控機制有待於進一步明確，為此，本研究擬採用基因轉染、RNA干擾、MTT、組織培養藥物敏感實驗以及裸鼠體內成瘤等實驗，進一步從體外、體內、組織水平多途徑、多層次驗證DJ-1在胃癌多藥耐藥中的作用。同時，從PI3K/Akt-Nrf2-ARE信號通路及其調控的MRP1、GST、NQO1、UGT及HO-1等多藥耐藥相關蛋白表達改變的角度進一步探討DJ-1參與胃癌多藥耐藥的分子機制。該研究的順利完成將為闡明胃癌多藥耐藥本質提供新思路和新方向，為逆轉多藥耐藥提供新靶點和新基礎。
結題摘要
胃癌是我國發病率和死亡率較高的惡性腫瘤之一。多藥耐藥（MDR）的發生是導致胃癌化療失敗的主要原因。因此，深入探索胃癌MDR發生的分子機制，確立胃癌MDR防治靶點對臨床上逆轉胃癌MDR、提高胃癌療效具有重要意義。DJ-l蛋白是一種絲裂原依賴性癌基因產物，與腫瘤密切相關。本研究探討了DJ-1在胃癌MDR中的作用及其分子機制。結果發現，與親本的SGC7901胃癌細胞相比，多藥耐藥的SGC7901/VCR胃癌細胞中DJ-1表達上調，化療藥物的IC50值、克隆形成率及阿黴素泵出率均明顯增加，而G0/G1比值、細胞凋亡率，細胞移植瘤化療後的生長抑制率均顯著降低。有趣的是，上述效應在DJ-1沉默的SGC7901/VCR/shDJ-1胃癌細胞中被逆轉，而在DJ-1過表達的SGC7901/DJ-1胃癌細胞中被重現。這些結果表明DJ-1參與了胃癌MDR的發生。在探討DJ-1促胃癌MDR的分子機制中，我們發現，與SGC7901胃癌細胞相比，SGC7901/VCR胃癌細胞中DJ-1與PTEN蛋白相互作用增加，PTEN酶活性下降，Akt磷酸化增加，此外，Nrf2磷酸化及其入核增加，同時，P-gp、Bcl-2、GST、NQO1及HO-1表達上調。同樣，上述效應在SGC7901/VCR/shDJ-1胃癌細胞中被逆轉，而在SGC7901/DJ-1胃癌細胞中被重現。更為重要的是，我們進一步發現，SGC7901/VCR及SGC7901/DJ-1胃癌細胞經PI3K抑制劑LY294002預處理或pLVX-shNrf2慢病毒感染後，Nrf2核轉位、P-gp, Bcl-2, GST, NQO1及HO-1表達以及細胞多藥耐藥性均明顯降低；而對DJ-1表達，DJ-1與PTEN相互作用及PTEN酶活性均無明顯影響。此外，上述細胞經LY294002預處理後Akt磷酸化及Nrf2磷酸化明顯被抑制；而pLVX-shNrf2慢病毒感染後僅抑制Nrf2磷酸化但對Akt磷酸化無影響。這些結果在胃癌細胞裸鼠移植瘤模型上也得以證實。總之，上述結果表明DJ-1促胃癌MDR的分子機制可能與其負調控PTEN活性間接激活PI3K/Akt/Nrf2信號通路，進而上調P-gp, Bcl-2, GST, NQO1及HO-1的表達有關。本研究為逆轉胃癌MDR提供了新靶點和新的干預環節。本研究按計畫全面完成，發表學術論文8篇，並培養碩士研究生3名。
