《microRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及機制研究》是依託浙江大學，由厲有名擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA-34a在非酒精性脂肪性肝病中的作用及機制研究
- 依託單位：浙江大學
- 項目負責人：厲有名
- 項目類別：面上項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
miRNA是一類具有重要調節功能的小分子RNA，其在肝臟疾病中的作用近年來逐漸受到關注。本課題組的前期研究發現， miR-34a的表達在不同NAFLD動物模型肝臟中均顯著上調；生物信息學分析結合文獻檢索發現，YY1、ACSL4和SIRT1為miR-34a的三個潛在靶標基因。為了進一步揭示miR-34a在NAFLD中的調控作用及其機制，本研究擬採用軟脂酸誘導L02細胞建立NAFLD細胞模型，用高脂飲食餵養C57小鼠構建NAFLD動物模型，採用重組腺病毒、RNAi和反義寡核苷酸等技術，通過離體和在體兩個水平，探討miR-34a表達變化對肝細胞脂變程度的影響，並進一步分析miR-34a對潛在靶標基因YY1、ACSL4和SIRT1，以及下游SREBP-1c、ATP和PPARα等效應分子表達的影響。本項目的實施，將為深入認識NAFLD的具體機制提供新的理論依據，並可能為開闢新的治療方法作出有益嘗試。
結題摘要
本研究旨在發掘並分析miR-34a在非酒精性脂肪性肝病中的機制及作用，發掘並分析miR-34a的作用靶標，尋找潛在的治療靶點。本研究採用游離脂肪酸(flee fatty acid，FFA)誘導L02細胞建立NAFLD細胞模型，用高脂飲食(high fat diet，HFD)餵養C57BL/6小鼠構建NAFLD動物模型。發現在NAFLD細胞和小鼠肝組織中miR-34a的表達水平顯著上調。通過體外轉染miR-34a inhibitor或小鼠尾靜脈注射miR-34a基因敲減慢病毒載體的方式來進行功能實驗。L02細胞胞漿及肝臟組織中脂滴沉積的程度得到顯著改善，甘油三酯的含量明顯下降，小鼠肝重/體重比值顯著下降，小鼠血清中AST水平顯著降低；採用線上資料庫預測發現PPARα是miR-34a可能的調控靶基因。進一步螢光素酶報告系統分析證實PPARα是miR-34a的直接作用靶點，其3'-UTR中存在miR-34a調控的作用序列。PPARα的下游脂變相關基因的表達隨著PPARα的改變而改變。本課題的實施，為揭示非酒精性脂肪肝的發生機制及探尋其有效治療方法提供了依據。
