免疫印跡

免疫印跡（immunoblotting）又稱蛋白質印跡（Western blotting），是根據抗原抗體的特異性結合檢測複雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術基礎上發展起來的一種新的免疫生化技術。由於免疫印跡具有 SDS-PAGE 的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性，現已成為蛋白分析的一種常規技術。免疫印跡常用於鑑定某種蛋白，並能對蛋白進行定性和半定量分析。結合化學發光檢測，可以同時比較多個樣品同種蛋白的表達量差異。原理如圖

基本介紹

• 中文名：免疫印跡
• 外文名：immunoblotting
• 又稱：蛋白質印跡
• 基本步驟：抗原分離、抗原印跡和抗原檢定

基本原理

將混合抗原樣品在凝膠板上進行單向或雙向電泳分離, 然後取固定化基質膜與凝膠相貼。在印跡紙的自然吸附力、電場力或其它外力作用下, 使凝膠中的單一抗原組份轉移到印跡紙上, 並且固相化。最後套用免疫覆蓋液技術如免疫同位素探針或免疫酶探針等, 對抗原固定化基質膜進行檢測和分析。

基本步驟

免疫印跡法（ 以抗原分析為例）基本上可分為抗原分離、抗原印跡和抗原檢定三個步驟。在每一步中因採用的具體實驗方法不同, 可構成多種免疫印跡分析系統。

優點

免疫印跡法是一項分析抗原、抗體的技術。

它具有下列優點：

1濕的固定化基質膜柔韌, 易於操作；

2固定化的生物大分子可均一的與各種免疫探針接近, 不會象凝膠那樣受孔徑阻隔；

3免疫印跡分析只需少量試劑；

4孵育、洗滌的時間明顯減短；

5可同時製作多個拷貝, 用於多種分析和鑑定；

6結果以圖譜形式可長期保存；

7免疫探針可通過降低PH值等方法, 象抹去錄音磁帶一樣將探針抹掉, 再換用第二探針進行分析檢測。免疫印跡法的套用範圍及優點不僅局限於此, 它必將隨著這一方法的深入研究而不斷發展和完善。