《酪蛋白糖巨肽(CGMP)維繫腸黏膜免疫自穩機制的研究》是依託天津商業大學，由陳慶森擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：酪蛋白糖巨肽(CGMP)維繫腸黏膜免疫自穩機制的研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：陳慶森
- 依託單位：天津商業大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
在前期國家自然科學基金的資助和所積累研究成果的基礎上，本課題通過對IBD模型BALB/c小鼠灌胃CGMP的試驗，採用流式細胞微球陣列技術、石蠟切片技術、TUNEL技術、螢光定量PCR、焦磷酸測序技術以及Western-bloting等技術手段，研究CGMP對Th型細胞因子表達、細胞凋亡及凋亡基因的表達、免疫信號通路途徑以及腸道菌群平衡的影響，探討CGMP對腸道屏障保護作用的機制，確定CGMP作為信號分子通過何種免疫信號通路途徑實現對機體腸黏膜免疫過程的調節；從分子水平上為CGMP維繫小鼠腸黏膜免疫自穩的能力和機制提供理論支撐，進而可為因Th1/ Th2失衡引起的細胞因子網路紊亂提供一種新的治療思路。最終達到對乳源CGMP維繫機體腸黏膜免疫自穩，調整維護腸道內環境作用等方面取得新成果和發現，實現CGMP生物活性功能的開發與利用，為提高大眾健康水平做出貢獻。
結題摘要
機體免疫自穩狀態的紊亂會導致IBD等疾病的發生，潰瘍性結腸炎（UC）是一種原因不明的慢性腸道疾病，開展食源性生物功能成分治療或改善UC具有重要價值。課題利用正常和惡唑酮誘導UC小鼠模型，系統地研究CGMP在維繫腸黏膜免疫自穩機制。運用流式微珠陣列技術(CBA)和ELISA探討CGMP對UC小鼠血清中7種細胞因子的影響；Western Blotting研究CGMP對UC小鼠腸黏膜免疫信號通路的影響。用HE染色和TUNEL檢測小鼠結腸大體形態損傷、病理及細胞凋亡變化；用RT-PCR檢測FasL、TNF-α、p53、p65、TGF-β1 mRNA的相對表達量。運用FISH結合DNA染色技術檢測CGMP對UC小鼠腸道菌群的調節作用，重點開展Ion Torrent技術研究CGMP對UC小鼠腸道菌群多樣性的影響，以探討CGMP改善小鼠UC的能力。結果表明CGMP（50 mg/kg•d）可顯著降低UC小鼠DAO、MPO活力及MDA含量，可保持上皮細胞完整性和對正常小鼠IL-4和IFN-γ的調節，提示CGMP可能具有調節Th1/Th2平衡的功效。CGMP有效抑制UC小鼠體內IL-1β、IL-5、IFN-γ和TNF-α的升高，而促進IL-10的分泌；CGMP可顯著抑制NF-κB的激活以及p38 MAPK的活性，也具促進MUC2表達。CGMP在一定程度上改善UC中結腸大體形態損傷、病理及其細胞凋亡指數。CGMP顯著抑制FasL，p65 mRNA的表達，說明CGMP主要是通過FasR/FasL通路對腸上皮細胞過度凋亡起到明顯的抑制作用。CGMP（50 mg/kg•d）可顯著降低UC小鼠腸道內腸桿菌、腸球菌的數量，促進腸道內雙歧桿菌、乳酸桿菌、擬桿菌和球形梭菌的增殖。對測序序列通過PCA、UniFrac等分析發現，UC小鼠中厚壁菌門和擬桿菌門的豐度降低而放線菌門和變形菌門豐度升高，干預後UC小鼠腸道內優勢菌群比例增加，糾正了腸道菌群失衡。以上研究提示，乳源CGMP具有減緩UC的功能。 另外，利用表觀遺傳學理論和方法開展了CGMP對大鼠早期結直腸癌影響的研究，探討CGMP是否具有降低p16基因異常甲基化發生率，達到早期預防、診斷以及治療結直腸癌的目的。研究表明連續灌胃結直腸癌大鼠CGMP可降低p16基因異常甲基化發生率，提示乳源CGMP對由表觀遺傳學引起的結直腸癌發生髮展具有改善控制作用。
