印跡技術是指將待測核酸分子結合到一定固相支持物上的方法。
southern印跡，將電泳分離的DNA片段轉移到一定的固相支持物上的過程。
基本介紹
- 中文名：印跡技術
- 外文名：Molecular imprinting technique
- 所屬科目：生物
- 目的：科技研究
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概念
印跡技術是指將待測核酸分子結合到一定固相支持物上的方法。
southern印跡，將電泳分離的DNA片段轉移到一定的固相支持物上的過程。
過程
DNA分子被限制酶切，經瓊脂糖凝膠電泳，將DNA片段按照分子量大小分離，然後將含DNA片段的瓊脂糖凝膠變性，將其中單鏈DNA轉移到硝酸纖維濾膜或者其他固相支持物上。而DNA片段的相對位置保持不變。可做下一步雜交反應。
northern印跡，將RNA變性及電泳分離後，將其轉移到固相支持物上的過程。
western印跡
也稱Western免疫印跡（WesternBlot或WesternBlotting），是指將蛋白質樣品經聚丙烯醯胺凝膠電泳分離，然後轉移至到固相載體（例如硝酸纖維素薄膜）上，然後用抗體通過免疫學反應檢測目的蛋白，分析基因的表達程度。能用鹼變性，防止水解。用甲醛變性。
southern印跡的步驟
1從組織中提取DNA
2用特定的核酸內切酶酶切
3瓊脂糖凝膠電泳
4鹼變性
5中和反應
6轉膜
7固定
8雜交
9雜交信號檢測
northern印跡的步驟:
1從細胞中提取總RNA
2甲醛凝膠變性電泳
3轉膜
4固定
5雜交
6雜交信號檢測
western印跡的步驟
1蛋白質樣品製備
2SDS-PAGE電泳
3轉膜
4封閉
5一抗孵育
6二抗孵育
7顯色
