RNA印跡技術

RNA印跡技術是在進樣前用甲基氧化汞、乙二醛或甲醛使RNA變性,而不用NaOH,因為它會水解RNA的2’-羥基基團。RNA變性後有利於在轉印過程中與硝酸纖維素膜結合,它同樣可在高鹽中進行轉印,但在烘烤前與膜結合得並不牢固,所以在轉印後不能用低鹽緩衝液洗膜,否則RNA會被洗脫。

在膠中不能加EB,因它為影響RNA與硝酸纖維素膜的結合,為測定片段大小,可在同一塊膠上加標記物一同電泳,之後將標記物膠切下,上色、照像。樣品膠則進行Northern轉印,標記物膠上色的方法是在暗室中將其浸在含5μg/mlEB的0.1mol/L醋酸銨中10min,在水中就可脫色。

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