far-western blotting是一種基於western blotting的一種分子生物學方法。在western blotting中用抗體來檢測目標蛋白，而在far-western blotting中用能夠與目標蛋白結合的非抗體蛋白質。因此，western blotting用來檢測特定的蛋白而far-western blotting則用於檢測蛋白質之間的相互作用。
基本介紹
- 外文名：far western blotting
- 類型：分子生物學方法
- 依據：western blotting
- 作用：檢測蛋白質之間的相互作用
方法
在傳統的western blotting中，凝膠電泳被用來從樣品中分離蛋白質，然後這些蛋白質在blotting過程中被轉移到膜上。目標蛋白在western blot中被抗體探針識別。far-western blotting用非抗體蛋白來檢測目標蛋白，通過這種方式，與探針結合的蛋白質就被檢測出來了。探針蛋白經常通過一種表達克隆載體在大腸桿菌中被生產出來。
探針蛋白可以通過一種常規的方法--放射自顯影顯現出來，它可以結合像His或FLAG的特殊的親和標籤或者蛋白質的特殊抗體。因此在凝膠電泳前將細胞提取液在煮沸的去垢劑中失活是檢測不需要自然摺疊狀態的蛋白質相互作用重要方法。
