Eastern Blotting

Eastern blotting是Western blotting的變形，對雙向電泳後蛋白質分子的印跡分析稱為Eastern印跡法.所謂的雙向電泳是先用等電聚焦-聚丙烯醯胺凝膠電泳（IEF-PAGE）分離蛋白質，然後也是將蛋白質的分離區帶、以電驅動轉移方式進行了印跡。

基本介紹

• 中文名：電驅動轉移等電聚焦電泳後的蛋白區帶
• 外文名：Eastern blotting
• 學科：生物學 生物化學 分子生物學

發展歷史

轉印電泳最先是由Southern於1975年發明的。在電流作用下，他成功地將DNA片段從瓊脂糖凝膠中轉印到硝酸纖維膜上進行分子雜交分析，因此稱為Southern blotting。後來，Alwine用類似方法也成功地將RNA從電泳膠中轉印到硝酸纖維膜上作分子雜交分析，但他並沒有稱這一技術為Alwine-blotting，而是稱之為Northern blotting，以便與Southern blotting相對應。1981年Burette又成功地將SDS-PAGE膠中的蛋白質轉印到膜上進行免疫學分析（如抗原抗體結合、蛋白質與配基結合等），繼之Alwine，Burette稱這一技術為Western blotting。這樣一來，在轉印電泳這個家族中，就有了Southern blotting，Northern blotting和Western blotting，僅僅缺一個Eastern blotting。其實後來有人提議將IEF膠(即等電聚焦電泳)中的蛋白質轉印到膜上的技術稱為Eastern blotting，但這一建議並未被廣泛接受。

簡介

EasternBlotting是一種檢測蛋白質翻譯後修飾的技術，其檢測目標是蛋白質上特定的修飾基團或部位，如脂肪酸鏈、糖基、磷酸化的胺基酸等等。在EasternBlotting的實驗中，通常要先用2D電泳將蛋白質分離，然後轉到膜上，再用特異的探針去檢測。蛋白質的翻譯後修飾是蛋白質執行功能過程中普遍存在的調控手段。