膜載體

中文名稱：膜載體

英文名稱：membrane carrier

定義：存在生物膜內負責各種溶質分子穿膜轉運的載體蛋白。有助於完成促進擴散和主動轉運。如線粒體內膜含有一載體家族，參與經氧化磷酸化合成ATP。其中ADP/ATP載體介導ADP和ATP的轉運，磷酸鹽載體則介導正磷酸與H+的同向轉運。 套用學科：生物化學與分子生物學（一級學科）；細胞生物學（一級學科）；生物膜（二級學科）

生物膜：圍繞細胞或細胞器的脂雙層膜。由磷脂雙層結合有蛋白質和膽固醇、糖脂構成，起滲透屏障、物質轉運和信號轉導的作用。

基本介紹

• 中文名：膜載體
• 外文名：membrane carrier
• 類別：全新的纖維膜生物載體
• 性質：載體蛋白和脂類

膜載體 -生物膜載體

這是一種全新的纖維膜生物載體，這種載體具有很大的比表面積。由於此種填料不需要藉助任何外加的機械設施便可在水中不斷擺動和波動，多餘的生物量會自然脫落，不斷更新表面。載體由複合纖維製成，可以抗污水和化學物的侵蝕，而其特殊的安裝結構，又能防止由於微生物膜的生長而引起的填料斷裂和粘結。通過控制剪力可以使掛上的生物膜具有自清作用，保證了微生物最大的繁殖力並提高其代謝率。載體填料的適用性很強，幾乎適用於各種類型的污水處理廠和生物反應器。模組式的設計使這種填料既易於在污水處理廠擴容項目中使用，也易於建造新的污水處理設施。

國內首創的利用配方技術改性的生物載體。將多種元素混合在合成樹脂中，提供最適合的微生物生長環境，並利用了生物酶的促進配方提高酶的生物催化作用。生物膜活性高、不易脫落，厚度維持在10-200μm。供氣時以流動狀態運行，呈高分散性及混合性；切斷空氣時以浸水狀態漂浮與底部污泥分離、同時可運作成生物過濾器。長時間運轉無污泥堵塞現象。污泥發生量少，比原有活性污泥法產生量少40-80%，大大減少了污泥的二次污染。與現有載體相比較處理效率提高了30-50%，運行費用降低30%。具有高效的除磷脫氮功能，氨去除率為98-100%，磷去除率為80-85%、氮去降率為80-85%09.生活污水二級處理後可直接回用，減少三級處理程式。使污水處理各種指標均優於國家回用水水質標準。沉澱池內污泥沉澱性能增加。載體設定後可使用50年，無需更換。可直接使用在好氧、厭氧、脫氧、沉澱池內。好氧池及攪拌式厭氧池：以流動狀反應器運作；水解及沉澱池：以固定層反應器運作。

膜載體 - 酶免疫測定

斑點-ELISA

斑點-ELISA（dot-elisa）的特點時：①以吸附蛋白質能力很強的硝酸纖維素膜為固相載體；②底物經酶反應後形成有色沉澱，使固相膜染色。在實驗室中斑點-elisa可按下法進行。在硝酸纖維膜上用鉛筆劃成4mm×4mm的小格，在每格中央點加抗原1～2μl，成為一個小點。乾燥後將每格剪下分別放入elisa板孔中，按elisa方法操作，最後加入能形成不溶性有色沉澱的底物，如在膜上出現染色斑點，即為陽性反應。因硝酸纖維素膜吸附性能強，一般在包被後須再進行封閉。如將硝酸纖維素膜裁剪成膜條，並在同一張膜條上點有多種抗原，將整個膜條與同一份血清反應，則可同時獲得對多種疾病的診斷結果。斑點-elisa的缺點是操作麻煩，特別是洗滌的操作很不方便。

套用斑點-elisa的原理，通過特殊工藝已製備出各種試劑，供臨床檢驗用。一般分三種類型：①將試劑膜貼上在塑膠條片，便於洗滌和觀察。②將試劑膜封在小盒內，膜下墊吸水劑，洗滌液通過膜吸入盒內。此即斑點免疫滲濾試驗。③將試劑膜固定在小槓框格中放入特殊的自動分析儀中檢測。套用這一系統可做各種蛋白質、激素、藥物和抗生素的定量測定。

免疫印跡法

免疫印跡法（immunoblottingtest，ibt）亦稱酶聯免疫電轉移印斑法（enzymelinkedimmunoelectrotransferblot，eitb），因與southern早先建立的檢測核酸的印跡方法southernblot相類似，亦被稱為westernblot。免疫印跡法分三個階段進行。第一階段為sds-聚丙烯醯胺凝膠電泳（sds-page）。抗原等蛋白樣品經sds處理後帶陰電荷，在聚丙烯胺凝膠中從陰極向陽泳動，分子量越小，泳動速度就越快。此階段分離效果肉眼不可見（只有在染色後才顯出電泳區帶）。第二階段為電轉移。將在凝膠中已經分離的條帶轉移至硝酸纖維素膜上，選用低電壓（100v）和大電流（1～2a），通電45min轉移即可完成。此分階段分離的蛋白質條帶肉眼仍不可見。第三階段為酶免疫定位。將印有蛋白質條帶的硝酸纖維素膜（相當於包被了抗原的固相載體）依次與特異性抗體和酶標第二抗體作用後，加入能形成不溶性顯色物的酶反應底物，使區帶染色。常用的hrp底物為3，3'-二氨基聯苯胺（呈棕色）和4-氯-1-萘酚（呈藍紫色）。陽性反應的條帶清晰可辨，並可根據sda-page加入的分子量標準，確定各組分的分子量。本法綜合了sds-page的高分辨力和elisa法的高特異性和敏感性，是一個有效的分析手段，不僅廣泛套用於分析抗原組分及其免疫活性，並可用於疾病的診斷。在愛滋病病毒感染中此法作為確診試驗。抗原經電泳轉移在硝酸纖維素膜上後，將膜切成小條，配合酶標抗體及顯色底物製成的試劑盒可方便地在實驗室中供檢測用。根據出現顯色線條的位置可判斷有無針對病毒的特異性抗體。

重組免疫結合試驗

重組免疫結合試驗（recombinantimmunlbindingassay，riba）是與免疫印跡法的方法，不同之處在於特異性抗原不通過電泳分離轉印，而是直接分條加在固相膜上。riba已用於血清抗hcv抗體的測定和分析。hcv抗原成分複雜，包括有特異性的非結構區抗原、結構區抗原、核心抗原和非特異性的g抗原。在elisa中一般使用混合抗原包被，檢測到的血清抗體是綜合性的。riba將各種抗原成分以橫線條式分別吸附在硝酸纖維素膜的膜條上，放於特製的長條凹槽反應盤中與標本（一抗）和酶標二抗溫育和洗滌，最終加底物顯色後，顯色條帶提示血清中存在有針對這一吸附抗原的特異性抗體。根據條帶的粗細和顯色深淺，還可粗略估計抗體效價。

riba十分適合於含複雜抗原成分的病原體抗體的分析，除抗hcv外，也成功地用於抗hiv抗本的測定。