《TSP-1調控腹膜透析患者腹膜纖維化的機制研究》是依託上海交通大學，由姜娜擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：TSP-1調控腹膜透析患者腹膜纖維化的機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：姜娜
- 依託單位：上海交通大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
腹膜纖維化所致超濾衰竭是患者退出腹透的常見原因。既往研究證實轉化生長因子β1（TGF-β1）為觸發腹膜纖維化的重要因子，其需活化後才能發揮作用，血小板反應蛋白1（TSP-1）為TGF-β1的活化因子。本研究通過人腹膜間皮細胞（HPMC）體外培養，探討TSP-1對HPMC中TGF-β1表達和活性、Smad通路活化、間葉轉化的影響，葡萄糖、血管緊張素II等對TSP-1表達、TGF-β1表達和活性、Smad通路活化及間葉轉化的影響，TSP-1拮抗劑可否緩解上述刺激因子的作用。建立腹透大鼠模型進一步探討TSP-1對腹膜TGF-β1表達和活性、Smad通路活化、成纖維細胞募集、纖維化因子表達及超濾功能的影響，葡萄糖、血管緊張素II對TSP-1表達、TGF-β1/Smad通路活化及纖維化的影響，TSP-1拮抗劑可否緩解上述刺激因子的作用。本研究結果可為腹膜纖維化的發生機制以及治療靶點提供新的理論依據。
結題摘要
腹膜透析利用患者自身腹膜清除溶質毒素和多餘的水分，高糖透析液可導致腹膜纖維化，腹膜纖維化引起的超濾衰竭是影響患者技術生存率的重要危險因素。腹膜間皮細胞MMT是腹膜纖維化的重要機制。轉化生長因子β1（TGFβ1）在間皮細胞MMT和腹膜纖維化過程中的作用已被證實。血小板反應蛋白1（TSP1）是TGFβ1體內生理活化物。本研究旨在探討TSP1對TGFβ1活性的調控在腹透腹膜纖維化發生髮展中的作用和機制。 本研究首先探討了TSP1對人間皮細胞（Met5A細胞）TGFβ1表達和活化以及MMT的影響。實驗分為1. 正常對照組；2. TSP1刺激組；3. TSP1刺激+ TGFβ1中和組。發現TSP1上調了Met5A細胞中TGFβ1表達和活性，上調了MMT標誌因子纖連蛋白（FN）、人III型膠原蛋白（Coll III）、α平滑肌肌動蛋白（αSMA）、Snail的表達；使用TGFβ1中和抗體阻斷TGFβ1與細胞表面受體結合，下調TSP1引起的MMT；TSP1刺激Met5A細胞引起Smad2/3磷酸化，TGFβ1中和抗體可部分下調TSP1引起的TGF-β1/Smad信號通路活化。 繼而課題研究了使用TSP1拮抗多肽LSKL阻斷TSP1對TGFβ1的活化，對高糖誘導的人間皮細胞MMT的影響。實驗分為1. 正常對照組；2. 高糖刺激組；3. 高滲對照組；4. 高糖+TSP1拮抗劑組；5. 高滲+TSP1拮抗劑組。發現TSP1拮抗多肽LSKL可顯著降低高糖誘導的Smad2/3磷酸化及細胞核內轉移，下調高糖誘導MTT。 最後，本研究使用TSP1拮抗多肽LSKL阻斷TSP1對TGFβ1的活化，對高糖誘導的大鼠腹膜纖維化的影響。本部分建立了腹透大鼠模型，分為1. 正常對照組；2.尿毒症非腹透組；3. 腹透組；4.腹透+LSKL組。發現TSP1拮抗多肽LSKL降低了高糖誘發的腹膜組織FN、Coll III、αSMA和Snail的表達上調，減輕了高糖誘發的腹膜間皮下層膠原沉積。 綜上，研究發現： TSP1通過活化TGFβ1/Smad通路，促進人間皮細胞MMT的發生；高糖刺激人間皮細胞中TSP1的表達，TSP1拮抗多肽通過阻斷TSP1對TGFβ1的活化抑制高糖誘導的人間皮細胞MMT；TSP1拮抗多肽改善高糖所致的大鼠腹膜纖維化。本研究結果為腹透腹膜纖維化的發生機制提供了新的理論依據。
