《SIRT1在前列腺癌發生髮展中的作用及機制研究》是依託蘭州大學，由翟振興擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：SIRT1在前列腺癌發生髮展中的作用及機制研究
- 依託單位：蘭州大學
- 項目負責人：翟振興
- 項目類別：青年科學基金項目
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
大量研究表明SIRT1與腫瘤關係密切，SUMO化SIRT1提高其去乙醯化酶活性。前期研究顯示，與雄激素依賴性前列腺癌相比，SIRT1、ID1在雄激素非依賴性前列腺癌中選擇性表達，SIRT1通過去乙醯化抑制FOXO1活性。本項目擬通過RNA干擾、免疫沉澱、免疫印跡等方法，進一步探討SIRT1在前列腺癌發生髮展中的作用。通過觀察SUMO化反應，同時檢測SIRT1及SUMO化SIRT1的表達，明確HDAC4增加前列腺癌中SIRT1活性的機制；通過檢測AR轉錄基因的表達，明確AR依賴性前列腺癌中SIRT1與AR轉錄程式的關係；通過檢測BMP-4、ID1及FOXO1靶基因的表達，進一步明確SIRT1與FOXO1調控的前列腺癌細胞凋亡的關係。SIRT1在前列腺癌的發生與發展中具有重要作用，以其為治療靶點可能前列腺癌治療提供新的治療策略，並為前列腺癌的臨床治療提供理論依據。
結題摘要
前列腺癌是男性泌尿生殖系統最常見的惡性腫瘤，在美國男性癌症患者中發病率居第一位，病死率居於第三位，目前我國發現的患者多為晚期或轉移性前列腺癌，其生存時間僅為2-3年，嚴重危害男性健康，為家庭和社會帶來巨大負擔。大多數前列腺癌患者初始對抗雄激素治療反應較好，但均不可避免的轉變為去勢抵抗性前列腺癌，其過程複雜，成為目前前列腺癌治療的熱點與難點。研究發現SIRT1在很多病理、生理過程中如DNA修復、DNA損傷、細胞生存、細胞增殖、細胞分化等發揮重要作用，同時其與腫瘤關係密切，SIRT1在前列腺癌的發生、發展過程中的作用一直存在爭議。本研究通過設計siRNA，RT-PCR和western blot實驗檢測並篩選siRNA，通過免疫螢光實驗檢測HDAC4的亞細胞定位，發現HDAC4可調節SIRT1的表達；通過MTT、細胞周期檢測及流式實驗發現抑制SIRT1的表達可通過阻滯細胞周期、促進細胞凋亡來抑制前列腺癌細胞的增殖；RT-PCR實驗發現siRNA下調SIRT1的表達可影響AR靶基因CDC20、UBE2C 及CDK1 mRNA的表達水平；ChIP實驗發現siRNA下調SIRT1的表達可抑制FOXO1調控的凋亡；通過Trans-well實驗明確了SIRT1在BMP-4調控前列腺癌細胞凋亡過程中的作用；通過建立前列腺癌裸鼠模型，western blot和免疫組化實驗發現SIRT1在早期雄激素依賴性前列腺癌中低表達，而在晚期雄激素非依賴性前列腺癌中高表達；免疫組化實驗顯示SIRT1在人前列腺癌組織中高表達，與腫瘤的分級與分期無明顯相關性，而在前列腺增生組織中低表達。因此，我們認為SIRT1在前列腺癌發生雄激素阻斷治療抵抗過程中具有重要作用，可能通過調控AR靶基因、FOXO1靶基因來實現，HDAC4為SIRT1發揮作用所必需，以SIRT1為靶點治療前列腺癌具有重要臨床意義，以SIRT1為靶向為雄激素阻斷治療抵抗的前列腺癌治療提供了新的方案。
