《SIRT1在人參皂苷Rb1抗內皮細胞衰老中的作用機制》是依託中山大學，由錢孝賢擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：SIRT1在人參皂苷Rb1抗內皮細胞衰老中的作用機制
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：錢孝賢
- 依託單位：中山大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
內皮細胞衰老是致動脈粥樣硬化的主要病因之一。目前發現SIRT1、Caveolin-1、eNOS對衰老均有重要作用。SIRT1作為組蛋白去乙醯化酶類似物，通過去乙醯化修飾諸多蛋白而對其功能進行調節。Caveolin-1為eNOS的負性調控蛋白，兩者均在各自的功能區存在乙醯化修飾位點。目前SIRT1對Caveolin-1的蛋白質功能性修飾尚未見文獻報導。本課題在前期研究基礎上，建立HUVEC衰老模型，分別觀察SIRT1對eNOS和Caveolin-1的去乙醯化修飾，及SIRT1、Caveolin-1、eNOS兩兩共分布情況，以及相應的衰老表型變化；再通過體內和體外實驗觀察人參皂苷Rb1是否通過SIRT1-Caveolin-1-eNOS相應機制發揮其抗衰老作用。我們的研究將完善SIRT1在衰老機制中的作用以及明確人參皂苷抗衰老的潛在機制,為內皮細胞衰老和動脈粥樣硬化的干預提供新的思路和靶點。
結題摘要
內皮細胞的衰老可促進動脈粥樣硬化的發生和發展，最終導致各種老年性疾病的發生，因此，內皮細胞的衰老是導致動脈粥樣硬化的重要病理生理機制。 本研究建立了H2O2誘導的人臍靜脈內皮細胞（HUVECs）早熟性衰老細胞模型，結果發現經過人參皂苷Rb1干預後，可以明顯改善各衰老指標的變化；干擾Sirt1的表達能夠誘導內皮細胞早衰老表型，而這一結果不受人參皂苷Rb1的影響。人參皂苷Rb1上調SIRT1的表達可能與其抑制了氧化應激反應有關。SIRT1可直接與Caveolin-1結合併去乙醯化caveolin-1的可摺疊區域，抑制Caveolin-1與eNOS結合，即SIRT1/ Caveolin-1 /eNOS軸參與內皮細胞衰老。 採用CPDL 16-25的HUVECs作為複製性衰老模型，人參皂苷Rb1能明顯減少衰老染色細胞陽性數目及PAI-1蛋白的表達，增加SIRT1和eNOS mRNA及蛋白的表達，減少Caveolin-1 mRNA及蛋白表達，增加NO的含量；沉默SIRT1後不影響Caveolin-1 mRNA及蛋白表達，但能抑制eNOS mRNA及蛋白的表達，人參皂苷Rb1干預後NO含量和PAI-1表達水平可得到部分逆轉。沉默Caveolin-1不影響eNOS mRNA及蛋白的表達，但能增強NO的含量，減少衰老染色陽性細胞數目及PAI-1 mRNA及蛋白的表達，人參皂苷Rb1干預後，NO的含量進一步升高，而PAI-1 mRNA及蛋白的表達水平進一步下降。 在小鼠衰老動物模型發現：人參皂苷Rb1可提高中年和老年小鼠視空間學習和記憶能力，減少中年和老年小鼠腦海馬組織中衰老染色陽性細胞數目；增加中年和老年小鼠海馬組織SIRT1蛋白的表達及血清NO的含量，減少小鼠血清中炎症指標IL-6 和TNF-α的水平，減少小鼠血清中MDA水平，提高小鼠血清中SOD的活性。與青年小鼠比較，老年對照組小鼠腦組織中的MDA含量增多，MAO活性增加，PAI-1蛋白表達增多，mTOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平增加。與老年對照組比較，注射人參皂苷Rb1小鼠的腦組織MAO活性，mTOR蛋白、p70S6K蛋白磷酸化水平均降低；注射高劑量Rb1組MDA含量、PAI-1蛋白的表達降低。 本研究將完善SIRT1在衰老機制中的作用以及明確人參皂苷抗衰老的潛在機制,為內皮細胞衰老和動脈粥樣硬化的干預提供新的思路。
