人參皂苷Rb1保護肝竇內皮細胞分子機制的研究

《人參皂苷Rb1保護肝竇內皮細胞分子機制的研究》是依託華中科技大學，由夏凌輝擔任項目負責人的面上項目。

基本介紹

• 中文名：人參皂苷Rb1保護肝竇內皮細胞分子機制的研究
• 項目類別：面上項目
• 項目負責人：夏凌輝
• 依託單位：華中科技大學

中文摘要

肝竇阻塞綜合徵（HSOS）是造血幹細胞移植常見併發症。肝竇內皮細胞（SEC）損傷是HSOS發病的中心環節，尋找有效的SEC保護劑有助於預防HSOS。受損SEC纖溶酶原活化物抑制劑-1(PAI-1)和組織因子（TF）表達增高，後兩者受一氧化氮（NO）和轉化生長因子β1（TGF-β1）調控。我們研究發現，人參皂苷Rb1對白消安導致的內皮細胞損傷具有保護作用，可增強臍靜脈內皮細胞NO合成、降低TGF-β1、TF和PAI-1表達。內皮微粒是內皮損傷－炎症凝血反饋環的重要中間環節，PAI-1能促進其釋放。因此我們推斷人參皂苷Rb1可能通過增強NO合成、阻斷TGF-β1信號通路及抑制內皮微粒生成而發揮SEC的保護作用。本課題擬建立SEC培養和HSOS動物模型，探討人參皂苷Rb1對SEC的保護作用，從TGF-β1、NO和內皮微粒途徑著手進一步研究其作用機制，為開發傳統中藥有效成分新的藥用作用奠定基礎。

結題摘要

本項目研究目的在於探討人參皂苷Rb1對肝竇阻塞綜合徵（HSOS）的發生是否具有預防作用，探索人參皂苷Rb1保護肝竇內皮細胞的作用機制，為尋找有效的肝竇內皮細胞保護劑提供實驗基礎和理論依據，對臨床有效防治HSOS的發生髮展，提高移植患者的生存率有重大臨床意義。三年研究工作基本按申請書要求執行。本研究從HSOS動物模型實驗、臨床實驗及體外細胞培養三方面來研究人參皂苷Rb1對HSOS的預防作用，重點從PI3K/AKT/eNOS/NO通路，TF、PAI-1及內皮微粒途徑著手，進一步研究人參皂苷Rb1的作用機制。我們成功利用野百合鹼建立起SD大鼠HSOS模型，研究人參皂苷Rb1對內皮細胞損傷的保護作用。通過本研究，我們證實野百合鹼可誘導內皮細胞的損傷和大鼠HSOS的發生，使內皮保護性因子NO的釋放量降低，其上游通路PI3K/AKT/eNOS中相關蛋白合成及表達亦降低，而TF、PAI-1及內皮微粒等相關內皮損傷因子表達增加。人參皂苷Rb1對大鼠肝臟無明顯毒副作用，對HSOS的發生具有一定的預防作用，但不能完全阻止HSOS的發生，其作用機制可能是通過調節肝臟PI3K/AKT/eNOS通路和TF、PAI-1及內皮微粒的途徑來減少肝竇內皮細胞損傷。我們還發現野百合鹼可誘導EA.hy926細胞損傷並使TF及內皮微粒的水平增高，而一定濃度的人參皂苷Rb1預處理後可拮抗上述效應。此外，發現aGVHD移植患者血漿中內皮微粒較健康對照組明顯提高，並首次報導了內皮微粒表面表達Fas抗原(Fas+-EMP)，而且發現allo-HSCT病人血漿中sFasL、EMP 、Fas+-EMP/MPs%在aGVHD發生時均顯著升高。Fas+-EMP可能通過Fas/FasL途徑，參與調節aGVHD相關的內皮細胞的免疫損傷，提示監測sFasL和EMP 有助於早期預測aGVHD，以此為靶點可探索治療aGVHD的新藥。