《淋巴管生長重塑與瓣膜發育的分子調控機制研究》是依託蘇州大學，由何玉龍擔任項目負責人的面上項目。
基本介紹
- 中文名：淋巴管生長重塑與瓣膜發育的分子調控機制研究
- 項目類別：面上項目
- 項目負責人：何玉龍
- 依託單位：蘇州大學
項目摘要,結題摘要,
項目摘要
收集淋巴管須有瓣膜才能維持其正常功能,目前對淋巴管生長重塑與瓣膜發生的調控機制還了解很少。受體酪氨酸激酶VEGFR-3是調控淋巴管發育的關鍵基因，本項目將利用我們新建立的小鼠模型，分析VEGFR-3及其下游PDK1與Akt在調控淋巴管發育與瓣膜形成中的作用及機制，具體包括：（1）利用VEGFR-3配體結合區條件性基因敲除小鼠及激酶區失活突變的小鼠，研究VEGFR-3功能區在淋巴管與瓣膜發育中的作用與機制；（2）利用PDK1與Akt基因敲除小鼠，分析VEGFR-3下游信號因子在淋巴管與瓣膜發育中的作用與機制；（3）研究VEGFR-3信號途徑在成熟淋巴管與瓣膜的結構與功能維持過程中的作用與機制； （4）分離野生型及VEGFR-3配體結合區敲除或激酶區失活突變的淋巴管內皮細胞，比較分析其介導的下游信號途徑包括PDK1與AKT的變化。此項目將為闡述淋巴管生長重塑及瓣膜的發生機制提供實驗依據及新的調控靶點。
結題摘要
淋巴管系統是心血管循環系統的重要支撐，在維持組織體液平衡、運輸大分子與免疫細胞回血液循環、及脂肪吸收等生理過程中起重要作用。近年來在淋巴管領域開展了廣泛深入的研究，已發現多個參與淋巴管生長調控的關鍵基因/信號途徑。淋巴管發育過程中的一個關鍵步驟是初級淋巴管網路重塑，包括形成有管壁有平滑肌細胞及管腔內瓣膜的集合淋巴管，這樣淋巴管系統才能發揮其正常的淋巴液回流功能，但目前對淋巴管成熟重塑與瓣膜發生的調控機制還了解得很少。本課題的主要目標是利用我們建立的條件性基因敲除小鼠，通過與全身性或淋巴管內皮細胞特異性表達Cre重組酶的轉基因小鼠交配,以獲得全敲除或細胞特異性基因敲除的遺傳改造小鼠模型,分析受體酪氨酸激酶VEGFR-3及相關因子在淋巴管形成、成熟重塑與瓣膜發生中的作用與機制。按課題計畫書,我們已順利完成該項目主要研究內容,並取得良好的研究結果，包括（1）分析了淋巴管網路形成與成熟重塑的關鍵信號途徑：我們的研究發現，受體酪氨酸激酶VEGFR3與TIE1在淋巴管生長與成熟重塑過程中發揮關鍵作用。利用VEGFR-3遺傳改造小鼠模型進行的研究表明，其配體結合區及激酶區介導的信號是淋巴管生成所必需的；VEGFR-3介導的信號缺失或不足導致淋巴管形態異常。Akt是受體酪氨酸激酶下游的重要介導因子，利用Akt1基因敲除小鼠進行的研究發現，敲除Akt1基因影響毛細淋巴管初級網路的形態，並引起集合淋巴管平滑肌細胞招募異常導致的結構與功能變化。（2）研究了淋巴管瓣膜發育的調控機制：淋巴管瓣膜的形成涉及到多個細胞步驟，已報導有多個基因參與該過程。我們的研究發現，敲除受體酪氨酸激酶TIE1、ANG2及下游AKT1基因都導致淋巴管網路重塑與瓣膜發育的缺陷。系統性的表型分析包括胚胎階段與出生後組織淋巴管的結構與功能已完成，利用從野生與遺傳改造小鼠所分離的原代淋巴管內皮細胞進行相關機制研究正在進行中。已發表與該項目相關的論文3篇,另有一篇已投稿修改中。淋巴管參與許多疾病的發生包括淋巴性水腫、腫瘤轉移及炎症反應等病理過程，該研究結果為相關疾病的臨床研究及開發新的治療方法提供實驗依據，具有重要的基礎與套用價值。
