基本介紹
- 中文名：流行性乙型腦炎病毒
- 別名：日本腦炎病毒
- 界：病毒界
- 科：黃病毒科
- 屬：黃病毒屬
- 首次分離時間：1935年
- 敏感動物：乳鼠
病毒簡介,生物學性狀,致病性,免疫性,微生物學診斷,特異防治,特異預防,特異治療,防治原則,監測,各地情況,
病毒簡介
簡稱乙腦病毒，屬於蟲媒病毒黃病毒科黃病毒屬。主要症狀為高熱、頭痛、嘔吐、昏睡、痙攣等。重症者可周身高燒、抽痙不止、腦水腫、呼吸或循環衰竭而死亡，部分患者留有後遺症。消滅蚊子孳生地，並撲滅越冬蚊和新生成蚊是預防乙腦的關鍵。豬是乙腦病毒的主要中間宿主和傳染源，在乙腦流行季節前，應對豬進行預防注射，可有效地降低乙腦發病率。人體接種疫苗可提高對乙腦病毒感染的抵抗力，對預防乙腦也有良好效果。乙腦尚無特效治療方法。早期住院對症治療，可以大大提高治癒率，減少後遺症。
流行性乙型腦炎病毒
1935日本學者首先從因腦炎死亡病人的腦組織中分離到該病毒，故國際上又稱日本腦炎病毒（Japanese encephalitis virus,JEV），所致疾病在日本稱日本乙型腦炎（JVE）。1950年以來，中國對該病進行了大量病原學和流行病學研究，為了與甲型腦炎相區別，定名為流行性乙型腦炎，簡稱乙腦，是中國夏秋季流行的主要傳染病之一，除新疆、西藏、青海外，全國各地均有病例發生，年發病人數2.5萬，病死率10%，大約15%的患者留有不同程度的後遺症。
生物學性狀
形態與結構
乙腦病毒為球形，直徑50nm，內有衣殼蛋白（C）與核酸構成的核心，外披以含脂質的囊膜，表面有囊膜糖蛋白（E）刺突，即病毒血凝素，囊膜內尚有內膜蛋白（M），參與病毒的裝配。病毒基因組為單股正鏈RNA，全長11kb，自5′至3′端依次編碼結構蛋白C、M、E以及非結構蛋白NS1—NS5，病毒RNA在細胞漿內直接起mRNA作用，翻譯出結構蛋白和非結構蛋白，在胞漿粗面內質網裝配成熟，出芽釋放。
敏感動物與細胞
乳鼠是常用的敏感動物，腦內接種乙腦病毒後3～4天發病，一周左右死亡，腦組織內含大量感染性病毒，是分離病毒、大量製備抗原的可靠方法。
BHK細胞系、C6/36細胞系及雞胚成纖維細胞是常用的敏感細胞，病毒在細胞內增殖引起細胞圓縮、顆粒增多、細胞脫落等CPE。在培養上清中含有傳染性病毒，胞漿內胞膜上可檢出特異性抗原。細胞培養增殖病毒簡便易行，已取代動物培養用物製備疫苗、診斷抗原，以及研究病毒複製機理、篩選抗病毒藥物等。
抗原特性
乙腦病毒囊膜糖白具有血凝特性，能凝集鵝、鴿、雛雞紅細胞，在pH6.2～6.4條件下凝集滴度高。病毒血凝素與紅細胞結合是不可逆的，但這種病毒與紅細胞形成的複合物仍有感染性，加入特異性抗體可抑制這種血凝現象。
對理化因素的抵抗力
乙腦病毒對熱抵抗力弱，56℃30分鐘滅活，故應在-70℃條件下保存毒株。若將感染病毒的腦組織加入50%甘油緩衝鹽水中貯存在4℃，其病毒活力可維持數月。乙醚、1：1000去氧膽酸鈉以及常用消毒劑均可滅活病毒。在酸性條件下不穩定，適宜pH8.5～9.0。
致病性
中國乙腦病毒的傳播媒介主要為三帶喙庫蚊。蚊感染病毒後，中腸細胞為最初複製部位，經病毒血症侵犯唾液腺和神經組織，並再次複製，終身帶毒並可經卵傳代，成為傳播媒介和貯存宿主。在熱帶和亞熱帶，蚊終年存在，蚊和動物宿主之間構成病毒持久循環。在溫帶，鳥類是自然界中的重要貯存宿主。病毒每年或通過候鳥的遷棲而傳入，或病毒在流行區存活過冬。有關病毒越冬的方式可為：①越冬蚊再感染鳥類，建立新的鳥—蚊—鳥循環；②病毒可在鳥、哺乳動物、節肢動物體潛伏越冬。實驗表明，自然界中蚊與蝙蝠息息相關，蚊將乙腦病毒傳給蝙蝠，受染蝙蝠在10℃，不產生病毒血症，可持續存在達3個月之外，當蝙蝠返回室溫環境3天后，出現病毒血症，構成蚊—蝙蝠—蚊的循環；③冷血脊椎動物為冬季貯存宿主（如蛇、蛙、蜥蜴等），可分離出病毒。家畜和家禽在流行季節感染乙腦病毒，一般為隱性感染，但病毒在其體內可增殖，侵入血流，引起短暫的病毒血症，成為乙腦病毒的暫時貯存宿主，經蚊叮咬反覆傳播，成為人類的傳染源。特別是當年生仔豬最為重要，對乙腦病毒易感，構成豬—蚊—豬的傳播環節，故在人群流行前檢查豬的病毒血症和蚊帶毒率，可預測當年人群的流行程度，並通過豬的免疫預防，可控制本病在豬及人群中的流行。
流行性乙型腦炎病毒感染的自然循環
當帶毒雌蚊叮咬人時，病毒隨蚊蟲唾液傳入人體皮下。先在毛細血管內皮細胞及局部淋巴結等處的細胞中增殖，隨後有少量病毒進入血流成為短暫的第一次病毒血症，此時病毒隨血循環散布到肝、脾等處的細胞中繼續增殖，一般不出現明顯症狀或只發生輕微的前驅症狀。約經4～7日潛伏期後，在體內增殖的大量病毒，再侵入血流成為第二次病毒血症，引起發熱、寒戰及全身不適等症狀，若不再繼續發展者，即成為頓挫感染，數日後可自愈；但少數患者（0.1%）體內的病毒可通過血腦屏障進入腦內增殖,引起腦膜及腦組織發炎，造成神經元細胞變性壞死、毛細血管栓塞、淋巴細胞浸潤，甚至出現局灶性壞死和腦組織軟化。臨床上表現為高燒、意識障礙、抽搐、顱內壓升高以及腦膜刺激症。重症患者可能死於呼吸循環衰竭，部分患者病後遺留失語、強直性痙攣、精神失常等後遺症。
免疫性
微生物學診斷
乙腦早期快速診斷通常採集性期患者血清或腦脊液特異性lgM ，也可做RT—PCR檢測標本中的病毒核酸片段，一般6個小時內可初步報告結果。常規血清學試驗，（H1、CF、NT）需取雙份血清，同時做對比試驗，當恢復期血清抗體滴度比急性期≥ 4倍時，有輔助診斷意義，可用於臨床回顧性診斷。由於乙腦患者病毒血症期短，直接檢出病毒抗原或分離病毒陽性率低，較少用於診斷試驗。
特異性lgM檢測
乙腦病毒感染髮病早期即產生特異性lgM ，病後2～3周達到高峰，故單份血清可做出早期診斷。可使用：① lgM 捕捉ELISA法（見23章）； ②2ME—NI法，血凝抑制抗體存在於lgM及lgG中，將早期單份血清分成二份，一份用2巰基乙醇（2ME）處理，以破壞lgM ，另一份不處理，然後同時做HI試驗，若處理血清抗體滴度比未處理的下降≥4倍，則為lgM 陽性； ③微量間接免疫螢光法，用螢光素標記的抗u鏈血清，檢測已與細胞抗原片結合的lgM，根據特異性螢光顆粒，判斷血清標本中的lgM存在。
常規血清學試驗
1.血凝抑制試驗 對乙腦診斷而言，本法特異性較低，但敏感性高，簡便易行。常用於病毒的初步鑑定，確定有無乙腦病毒存在。檢測血清標本中的HI抗體，多採用2ME—HI法。2.補體結合試驗 補體結合抗體僅存在於lgG 中，病後出現遲，消失快，適用於診斷感染。
乙腦的臨床症狀與病毒相應抗體的關係
3.中和試驗 抗體存在於lgG、 lgM中，出現早，維持久。中和試驗特異性和敏感性都高，但操作繁雜，需用大量動物或組織培養管，需時較久，不適於臨床診斷常規使用，而在血清學流行病學調查和病毒鑑定上有價值。
病毒分離與鑑定
取病屍腦組織研磨成10%懸液，接種1-3日齡乳鼠腦內，待發病頻死時，取腦懸液，用單克隆抗體做中和試驗鑑定病毒。也可接種敏感細胞（如C6/36細胞系）分離病毒。
特異防治
特異預防
現用的乙腦滅活疫苗是用地鼠腎細胞培養增殖，甲醛滅活製成，初次免疫時，皮下注射2～3次，間隔7-10天，以後每年加強注射一次，免疫力維持半年左右，保護率達66-90%。中國已篩選出乙腦病毒減毒株，用地鼠腎細胞培養製成減毒活疫苗，只需皮下注射一次，安全有效，正作現場觀察。疫苗接種對象是10歲以下兒童和來自非疫區的軍民。流行區飼養的仔豬接種乙腦疫苗，以杜絕傳染來源，也可使豬健康成長。
防蚊滅蚊是預防本病的有效措施。
特異治療
乙腦治療仍採用對症處理及支持療法，有報導用病毒唑、干擾素、恢復期血清等治療，可能減輕病勢，但已出現腦炎症狀者，則無治療效果。中國採用淋巴細胞雜交瘤技術，製備出高中和活性乙腦單克隆抗體，經系統動物實驗治療證明安全有效，95年經衛生部批准進入 Ⅰ、Ⅱ 期臨床試驗，是一種特異免疫治療製劑。
防治原則
防蚊、滅蚊和動物接種
預防接種
中國主要使用由地鼠腎細胞培養製備的流行性乙型腦炎病毒P3株滅活疫苗。通常在病毒感染開始流行前1個月進行疫苗接種，重點接種對象是10歲以下兒童和來自非流行區的易感人群；主要採用皮下注射2次（間隔7～10天），次年加強注射1次的方式進行；預防接種後人群保護率可以達到76%～90%。但是，由於死疫苗誘導產生抗體的持續時間短、需要多次接種等缺點，減毒活疫苗的研究受到重視。主要根據病毒吸附和形成蝕斑能力的差異來選育有效的減毒活疫苗，中國已經選育出的SA14-14-2和SA14-2-8株減毒活疫苗，對易感人群以及豬和馬等家畜進行免疫接種後的抗體陽性率可達到90%以上，並且抗體產生的持續時間較長。
監測
乙腦的流行規律尚不十分清楚，因此尚無理想的監測方法。下面介紹幾種監測方法提供參考
（一）媒介蚊的強度和出現早晚：定期、定地點、定時間、定量捕捉蚊子，特別是定地點最好在牲畜棚（特別是豬圈）內，定時間最好是黃昏7-8點蚊子吸血高峰時，觀察三帶喙庫蚊的出現時間及其在蚊中所占比例。
（二）豬抗體的監測：豬群抗體陽性率調查及豬抗體50%陽轉日出現時間（提前或後延）在一定程度上反映三帶喙庫蚊的強度和出現早晚。查豬抗體時要注意母體抗體或既往感染對結果的影響，最好是4-5月齡的仔豬，其母體抗體已消失，用這樣的豬觀察抗體比較可靠。
（三）人群抗體水平的監測：有人報導隱性感染高的地區，人群血凝抑制抗體陽性率達78%，乙腦的發病率就低，僅為2.6/10萬；而隱性感染低的地區，血凝抑制抗體陽性率僅為10%，則乙腦的發病率高達38.3/10萬。
（四）氣象因素：特別是氣溫和雨量很重要，氣溫高不僅有利於蚊蟲的孳生，而且能提高病毒在蚊體內的毒力和數量。晴天和雨天交替最有利於蚊蟲的孳生。
