《microRNA146a抑制肝癌侵襲轉移的多分子調控機制研究》是依託中國人民解放軍第四軍醫大學，由張征擔任項目負責人的青年科學基金項目。
基本介紹
- 中文名：microRNA146a抑制肝癌侵襲轉移的多分子調控機制研究
- 項目類別：青年科學基金項目
- 項目負責人：張征
- 依託單位：中國人民解放軍第四軍醫大學
中文摘要,結題摘要,
中文摘要
microRNA分子是一類進化上保守的內源性非編碼小RNA分子，在轉錄後水平調控靶基因的表達，廣泛地參與了腫瘤的發生髮展。我們前期基於microRNA晶片和生物信息學分析，發現miR-146a在肝癌組織中低表達，且與肝癌的臨床轉移相關；外源表達miR-146a可抑制肝癌細胞體內/外的侵襲轉移能力，但其作用機制尚未完全闡明。本項目在前期研究基礎上，擬採用螢光素酶報告基因、Western blot等方法確定miR-146a在抑制肝癌轉移過程中調控的靶基因，及對下游信號通路分子的影響；從細胞水平和動物水平探討miR-146a在抑制肝癌轉移中對細胞生物學行為的作用，並通過檢測肝癌組織中miR-146a及其靶基因的表達水平，明確miR-146a在轉錄後水平調控靶基因的具體形式。最終闡明miR-146a抑制肝癌侵襲轉移的作用機制及可能的下游信號轉導通路，為抑制肝癌轉移提供新的候選基因靶位。
結題摘要
一、明確miR-146a在肝癌組織中普便下調，並與腫瘤轉移相關。 二、明確miR-146a抑制肝癌細胞的侵襲運動 三、探討了miR-146a抑制肝癌細胞侵襲轉移的機制：miR-146a可促進腫瘤抑制基因APC表達，抑制VEGFA表達。雷射共聚焦結果表明：miR-146a抑制β-catenin在核內聚集；而下調miR-146a的達可促進β-catenin在細胞核內的積累。體內研究表明：miR-146a可抑制小鼠外周血中VEGFA的表達。 四、HAb18G/CD147分子是miR-146a作用的靶分子：luciferase reporter assay及Western blotting分析結果表明miR-146a可接合到HAb18G/CD147 （以下簡稱CD147）3’-UTR並抑制CD147的表達。實時PCR結果提示miR-146a對CD147蛋白表達的影響與該分子mRNA水平無關。結果提示：miR-146a通過轉錄後翻譯抑制CD147分子表達。外源表達不含3’-UTR的CD147，可抵消因miR-146a所引起的細胞侵襲能力下降，並可上調細胞內VEGFA的表達，但對APC的表達無明確影響；siRNA干涉SMMC-7721細胞內CD147表達，細胞的侵襲能力下降，同時也抑制了VEGFA的表達。綜上結果表明CD147分子是miR-146a作用的一個新的靶分子。 五、肝癌組織中miR-146a和CD147分子相關性分析：miR-146a在肝癌組織中的表達水平與轉移呈負相關，且與CD147、VEGF和NF-κB分子蛋白呈負相關。 六、肝癌組織中miR-146a啟動子區甲基化抑制miR-146a的表達，CpG位點的甲基化水平可能與肝癌的侵襲轉移潛能密切相關。
